ELISA實驗殘留液體中包含未結(jié)合的抗原或抗體，它們會增加背景信號。殘留量越小，殘留液體越少，轉(zhuǎn)移到下一步的干擾液體也就越少。

吸液高度會明顯影響殘留量；如果洗滌吸頭與反應(yīng)孔底部的距離稍大，那就會讓殘留量急劇增加。反之，如果洗滌吸頭壓著反應(yīng)孔底部，那么也會使吸液效率降低，殘留量增加。

目前的洗板機(jī)一般使用兩種類型的洗頭：剛性和浮動。浮動洗頭中的吸頭可在洗滌過程中自由上下移動，而剛性洗頭則固定在適當(dāng)?shù)奈恢?。使用剛性洗頭的洗滌操作在優(yōu)化起來更為復(fù)雜，因為你需要非常仔細(xì)地調(diào)整吸液高度。如果你們實驗室使用幾種不同的板，那可能會很耗時。在使用浮動洗頭時，吸頭會降到反應(yīng)孔的底部。調(diào)整高度就不是很重要，因此洗頭會下降到底部。

抽吸的位置也對殘留量有著重要影響；如果每個孔只使用一個抽吸點（這很常見，因為更快），那么抽吸的位置需要優(yōu)化。zui佳的位置取決于洗頭的性狀，但它幾乎不在反應(yīng)孔的中間，即使這是所有洗頭zui 常見的默認(rèn)位置。一般來說，zui佳位置在孔中間與孔壁之間的某處。

反應(yīng)孔的形狀也會影響殘留量。C形底（平底圓角）的微孔板一般會比那些平底尖角的微孔板殘留量更低。

如果沒有自動洗板機(jī)，采用手工洗滌，那么也需要注意幾點。使用8道或12道微量移液器，采用倒吸的方法進(jìn)行洗滌；不同廠家的洗液不宜相互混用。洗板時需保證微孔板平放，將洗滌液注滿各孔，但盡量避免漏液溢液，以每孔300 μl為宜；板洗次數(shù)一般為3次，要保證洗板的浸泡時間，每次浸泡時間一般為30-60 秒；盡量減少洗液殘留量，推薦每次洗板后進(jìn)行拍板，并及時更換吸水紙，避免吸水紙的碎屑粘到反應(yīng)孔內(nèi)。

ELISA看起來很簡單，但是在實際操作過程中，也不能掉以輕心，還是應(yīng)該仔細(xì)檢查洗滌步驟，才能獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。