組織細(xì)胞培養(yǎng)分離技術(shù)

日期：2024-11-25 00:28

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摘要：組織細(xì)胞培養(yǎng)分離技術(shù)

組織細(xì)胞的分離：

1、離心分離法組織材料為血液、羊水、胸水、腹水，低速800-1000轉(zhuǎn)/分，5-10分鐘。

2、機(jī)械分離法

（1）剪切分散法，在進(jìn)行組織塊移植培養(yǎng)時，使用該法

（2）機(jī)械分散法纖維成份很少的組織進(jìn)行培養(yǎng)時采用的分離方法，如腦組織、部分胚胎組織以及一些腫瘤組織。

3、消化分離法

（1）胰蛋白酶法作用機(jī)理：作用于蛋白質(zhì)的肽鍵，使蛋白質(zhì)水解。適用于消化細(xì)胞間質(zhì)較少的軟組織，還可適用于傳代細(xì)胞培養(yǎng)。作用因素：pH值、溫度、濃度、時間、組織塊類型。鈣、鎂、血清對其有抑制作用

（2）膠原酶法，對膠原的消化作用很強(qiáng)，適用于纖維性組織、上皮及癌組織

（3）EDTA法，EDTA（乙二胺四乙酸）是一種非酶性消化物，作用機(jī)制：可從組織環(huán)境中吸取鈣、鎂離子，形成絡(luò)合物，利用結(jié)合后的機(jī)械力使細(xì)胞變圓而促進(jìn)細(xì)胞相互分離