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ELISA夾心法原理及?一般操作步驟

日期:2024-11-24 09:26
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摘要: ELISA夾心法原理及一般操作步驟: 夾心法常用于檢測大分子抗原. 原理:針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物。一般的操作步驟為: 1. 將具有專一性的抗體固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體。 2. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結。 3. 洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次抗體,與待測抗原進行鍵結。 4. 洗去多余未鍵結一次抗體,加...

ELISA夾心法原理一般操作步驟

夾心法常用于檢測大分子抗原. 原理:針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物。一般的操作步驟為:

1. 將具有專一性的抗體固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體。

2. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結。

3. 洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次抗體,與待測抗原進行鍵結。

4. 洗去多余未鍵結一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結。

5. 洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結果。