參數(shù)規(guī)格:
產品名稱 |
杏仁熒光PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R015259 |
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
KDR Others Mouse 小鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細胞裂解液 (陽性對照) L-天門冬氨酸質量規(guī)格:>99%,BRL-Aspartic acid
小鼠肺大靜脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLL-天門冬氨酸(標準品)質量規(guī)格:>99%(T),標準品L-Aspartic acid
CAL 27人舌鱗癌細胞 Human tongue squamous cell carcinoma cell line CAL 27 DMEM+10% FBSL-半胱胺酸鹽酸鹽無水物質量規(guī)格:>98%,BRL-Cysteine ,anhydrous
IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽質量規(guī)格:0.98L-Lysine methyl ester di
NCI-H446(人小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 COLO 205(結腸癌細胞)L-蛋氨酸甲酯鹽酸鹽質量規(guī)格:>98%L-Mine Methyl Ester
PC-3 人前列腺癌細胞N-Debenzoyl-7-{[(2,2,2,-trichloroethyl)oxy]carbonyl}紫杉醇質量規(guī)格:美國進口N-Debenzoyl-7-{[(2,2,2,-trichloroethyl)oxy]carbonyl}paclitaxel
CL-0442SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×26α,3'-對二羥基紫杉醇質量規(guī)格:美國進口6α,3'-p-Dihydroxy Paclitaxel
人海馬神經元7-差向 10-去乙酰基紫衫醇質量規(guī)格:美國進口7-Epi 10-Desacetyl Paclitaxel
人正常肝細胞;L-02 人結腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL(S,S)-帕洛諾司瓊鹽酸鹽-d4質量規(guī)格:美國進口(S,S)-Palonosetron Labeled d4
人小氣道上皮細胞HSAEpiC2'-O-(2-甲氧乙基)腺苷質量規(guī)格:美國進口2'-O-(2-Methoxyethyl)adenosine
杏仁熒光PCR檢測試劑盒CD14
Others Cynomolgus 食蟹猴 CD14 人細胞裂解液 (陽性對照) 三氧化鉬shēng huà shì jì容量:500毫升
小鼠巨噬細胞MMa2,6-二錄本安 2,6-Dichlorocnilinq
22RV1細胞,人前列腺癌細胞 豬腎細胞,LLC-PK1細胞 人腎皮質上皮細胞HRCEpiC二甲乙二1咯三酸,英文名或英文縮寫:Domoic acid,級別:2.5N,規(guī)格:1克
HPAC(人胰腺腺泡上皮癌) 5×106cells/瓶×2青霉素敏感紙片shēng huà shì jì容量:RT100張/包
293T(人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H051人胎盤滋養(yǎng)層細胞完全培養(yǎng)基100mL 人膀胱基質成纖維細胞RNAHBdSF miRNA5 μg124-68-52-基-2-甲基-1-;2-羥甲基-2-胺;異丁;2-基2-AMino-2-metxyl-1-propanol;IsobutanolaMine;2-AMinoisobutanol;AMP
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研