參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
馬皰疹病毒4型熒光PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R015243 |
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允?/span>DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
CL-0391NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞)5×106cells/瓶×2AEBSF絲氨酸抑制劑質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAEBSF HCl
IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人細胞裂解液 (陽性對照) AEBSF(進分)質(zhì)量規(guī)格:>97%,進分TCI A2215AEBSF HCl
人羊膜上皮細胞總RNAHAmEpiC NA鹽酸貝他定(進口)質(zhì)量規(guī)格:≥98%,美國進口Bestatin HCl
SKBr-2HL細胞,人癌細胞 雞胚原代肝細胞,CEL細胞 SGC-7901, 人胃腺癌細胞系N-羥基丁二(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRN-Hydroxysuccinimide
MuM-2C(人眼脈絡色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2沒食子酸一水物(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Gallic acid monohydrate
CD276 Others Mouse 小鼠 B7-H3 / CD276 人細胞裂解液 (陽性對照) 3',5'-芐氧基苯乙酮(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)3',5'-Dibenzyloxyacetophenone
小鼠單核巨噬細胞;J774A.13,5-二甲氧基芐醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)3,5-Dimethoxybenzyl Alcohol
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3 IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL3,5-二甲氧基芐溴(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)3,5-Dimethoxybenzyl Bromide
AGS人胃腺癌細胞 Human3,5-二溴-1-基硅基苯(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)3,5-Dibromo-1-trimethylsilylbenzene
TNFRSF1B
Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照) 3,5-二-L-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR3,5-Diiodo-L-tyrosine
dihydrate
馬皰疹病毒4型熒光PCR檢測試劑盒SHG44細胞,膠質(zhì)瘤細胞 人SV-40轉化肺成纖維細胞,WI-38AV13細胞 膀胱成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)(S)-2,6-二基己酸鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:L-Lysine HCL,級別:BR,99%,規(guī)格:25克
豹貓皮膚成纖維樣細胞;LCS53-溴本;間溴本 3-BroMotoluqnq;3-BroMo-1-Mqthylbqnzqnq;M-Tolyl broMidq 291-17-3
FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細胞裂解液 (陽性對照) HOTSTARTTAQPCRMASTERMIX,2X熱啟動Taq PCR Master Mix生物技術級無色透明液體 -20 degrees Csigma
CL-0308TE-13(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×25-BrU5-溴尿嘧啶核苷1克高,95%
VNN1
Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 134-32-71-胺;α-胺;α-基;1-基1-NaphthylaMine;Naphthalidine;1-NaphthalenaMine;α-NaphthylaMine
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。產(chǎn)品僅用于科研