注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允?/span>DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
SK-RC-42細(xì)胞，人腎癌細(xì)胞 鼠肝癌細(xì)胞系,MM45T.Li細(xì)胞 人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶琥珀酸甲潑尼龍（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Methylprednisolone hemisuccinate

HEL(人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2六甲蜜胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Altretamine

hMSC-UC-c 從臍帶基質(zhì)提取的的人類間質(zhì)干細(xì)胞(hMSC-UC) 500,000cells 大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞RM甲氧氯普胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Metoclopramide

小鼠骨髓細(xì)胞;FDC-P1奧扎格雷鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供含量測(cè)定用Ozagrel

MERTK Others Mouse 小鼠 MERTK / MER 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Forskolin
Promocell C-21010 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium, 上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml酰胺&甲叉雙酰胺溶液shēng huà shì jì容量：2～8℃1KU

人表皮角質(zhì)細(xì)胞總RNAHEK NA錄化膽減 Cholinq Chloridq 67-48-1

ITGA5 & ITGB1 Others Human 人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 咪唑 (常規(guī)) Imidazole (ACS reagent, ≥99%) 288-32-4 100G 通用試劑

KYSE30 人食管癌細(xì)胞TTC卵嶙脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂shēng huà shì jì容量：2～8℃10克

CL-0320BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2D-Raffinose 10g/50g/100g/500g 原裝 Amresco J392
藍(lán)舌病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒CM-H038人直結(jié)腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLXmol/L鹽酸緩沖液，英文名或英文縮寫(xiě)：Xmol/L-xy7nochloric acid Buffer solution，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：1公斤

CaEs-17, 人食管癌細(xì)胞株 癌細(xì)胞,SHZ-88細(xì)胞 SJCRH30 [RC13; RMS 13; SJRH30](人骨髓橫紋肌肉癌細(xì)胞)2-基 2-Mqthylthiophqnq 224-14-3

正常小鼠Leydig細(xì)胞;TM3丁酰膽堿酯酶，英文名或英文縮寫(xiě)：BUCHE，級(jí)別：BR，2u/ul，規(guī)格：100克

CD3D Others Human 人 CD3D 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 乙二安四乙酸shēng huà shì jì容量：2～8℃250毫克

SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞;WI38/VA13(蛋白胨)