參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
鵝細(xì)小病毒熒光PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R015215 |
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允?/span>DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 吡哌酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Pipemidic acid質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL3鹽酸氟奮乃靜(標(biāo)準(zhǔn)品)FLUPHENAZINE 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測定用
SPC-A1細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞 綠猴腎細(xì)胞,Vero細(xì)胞 CM-M034小鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鴉膽子苦醇(標(biāo)準(zhǔn)品)(+)-Brusatol質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Sf-9(昆蟲細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸哌唑嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Prazosin HCl質(zhì)量規(guī)格:含量測定
NHEK.f-c 正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(NHEK)少年,單一來源 500,000cells 原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml7-羥基7-Hydroxycoumarin質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR
16HBE細(xì)胞,人支氣管上皮細(xì)胞 化學(xué)轉(zhuǎn)化小鼠鼻咽上皮細(xì)胞,TMNE細(xì)胞 CL-0178OVCAR-3(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2酸鉀shēng huà shì jì容量:1克
U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×22,3-二基丁烷 標(biāo)準(zhǔn)品 2,3-DIMqTHYLBUTcNq1979/9/8
HVMF-c 人類絨毛間質(zhì)成纖維細(xì)胞(HVMF) 500,000cells 腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)碳酸銅shēng huà shì jì容量:RT5克
成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)dNTPMIX100mMSOLUTIONpH7.0dNTP混合溶液,100 mM , pH 7.0超級40 M897
PRELP
Others Human 人 PRELP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5680-80-8L-絲酸鹽酸鹽L-Serine metxyl ester xy7nochloride
鵝細(xì)小病毒熒光PCR檢測試劑盒小鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞MA-cL-天冬素一水,英文名或英文縮寫:L-Asparagine Monohydrate,級別:BR,99%,規(guī)格:10克
G-7細(xì)胞,小鼠骨骼肌肌肉母瘤細(xì)胞 人腎癌細(xì)胞,GRC-1細(xì)胞 人小氣道上皮細(xì)胞HSAEpiC3-錄-1-炳醇 98% 3-Chloro-1-propcnol 67-30-2
小耳豬腎細(xì)胞;SEPfkRIBOZOLME(MICROENRICHED)RIBOZOL ME粉色至深粉色透明液體RTsigma
OPCML Others Human 人 OPCML 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L(+)-2-基,英文名或英文縮寫:L-2-Aminobutyric acid,級別:BR,98.5%,規(guī)格:25克
CM-R100大鼠腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL132-53-62-亞硝基-1-酚;β-亞硝基-α-酚2-nitnoso-1-naphthol;1,2-Naphthoinoneone-2-oxiMe;1,2-NaphthoinoneoneiMine-2-oxiMe;C.I. 10010
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研