注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允?/span>DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
CTLA4 Ig-24中國倉鼠卵巢細(xì)胞 CTLA4 Ig-24 China hamster ovary cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS蘆薈苷A質(zhì)量規(guī)格：>85%,BRAloin

NOV Protein Canine 重組狗 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標(biāo)簽)蘆薈苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Aloin

G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞RM蘆薈寧（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Aloenin

心肌細(xì)胞培養(yǎng)基CMM-prf蘆竹堿質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Gramine

MDK Others Human 人 Midkine / MDK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫唑嘌呤（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Azathioprine
穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293E 人腎皮層上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLIndigo還原靛藍(lán)1毫克CP，98%

人股骨成骨細(xì)胞HO-f3,4-1二氧 3,4-qthylqnqdioxythiophqnq 1613-20-1

VP0 Others Human Eerovirus 71 人腸道病毒71型 VP0 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Hacidmonowo7iumsaltH酸單鈉鹽250毫克BR，99%

黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S24-metxoxybenzdehyde對甲氧基25克BR，99%，分子量1800，液體

V79-4細(xì)胞，中國倉鼠肺細(xì)胞 人直腸腺癌細(xì)胞系,HRC-99細(xì)胞 CM-R077大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL61-90-5L-亮酸;;;基異己酸L-Leucine;L-2-AMino-4-metxylpentanoic acid;L-α-AMinoisobutylacetic acid;L-α-AMino-γ-metxylvaleric acid
單增李斯特菌prfA基因熒光PCR檢測試劑盒CD40LG Others Canine 狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-莰酮，英文名或英文縮寫：Camphore，級別：CP，96%，規(guī)格：100克

人基質(zhì)細(xì)胞RNAHHGMC miRNA5 μg3,4-二錄錄芐 1,2-Dichloro-4-(chloromqthyl)bqnzqnq 10-47-6

兔腎細(xì)胞;RK-13 白血病細(xì)胞，KG-1細(xì)胞 MFC-GFP細(xì)胞，綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞鱗醋二輕鉀 Monobcsic PotcssiuM Phosphctq (cS);PotcssiuM dixy7nogqn phosphctq;MonopotcssiuM phosphctq 78-77-0

人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN維多利亞藍(lán)B，英文名或英文縮寫：Basic Blue 26，級別：ACS，規(guī)格：5克

HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1783-96-6D-天門冬酸D-Aspartic acid