抗體的制備過(guò)程:
1. M Y原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為M Y原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有M Y原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. M Y動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. M Y血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. M Y血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. M Y血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 |
Anti-PBEF(NT)抗體 |
規(guī) 格 |
0.1ml/100μg 0.2ml/200μg |
貨號(hào) |
BJ-K95867 |
英文名稱 Anti-PBEF(NT)
中文名稱 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素抗體(N端)
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
別 名 pre-B-cell colony-enhancing factor 1; PBEF1 protein; AI480535; 1110035O14Rik; AI314458; DKFZP666B131; EC 2.4.2.12; MGC117256; NAmPRTase; NAMPT; Nicotinamide phosphoribosyltransferase; PBEF; PBEF1; Pre B cell colony enhancing factor 1; Pre B cell colony enhancing factor; Pre B cell enhancing factor; Visfatin; NAMPT_HUMAN.
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 生長(zhǎng)因子和 糖尿病
蛋白分子量 predicted molecular weight: 55kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PBEF N-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
對(duì)照/標(biāo)本無(wú)染色 產(chǎn)品僅用于科研
① 確認(rèn)是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時(shí)間。
③ 對(duì)照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測(cè)系統(tǒng)是否和一抗匹配,這一點(diǎn)是非常重要的。比如,如果一抗是兔來(lái)源的抗體,二抗一定要用抗兔的二抗來(lái)匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。
④ 檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。
⑤ 檢查抗體的有效期和保存條件,尤其是標(biāo)記了酶或熒光素的抗體,現(xiàn)在大多數(shù)試劑公司的抗體均要求在4~8℃條件下保存,應(yīng)避免反復(fù)凍融,試劑保存時(shí)一定要避免與揮發(fā)性有機(jī)溶劑同放一室,以免降低抗體的效價(jià)。
⑥ 檢查標(biāo)本的儲(chǔ)存條件,好用已知陽(yáng)性的標(biāo)本來(lái)同時(shí)做陽(yáng)性對(duì)照。
⑦ 檢查色原/底物溶液,簡(jiǎn)單的檢測(cè)方法是將一滴標(biāo)記有酶的抗體加入到制備好的底物溶液中,如果底物發(fā)生預(yù)期的顏色變化,則可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后應(yīng)在一定時(shí)間內(nèi)用完,否則會(huì)失效。
⑧ 檢查沖洗液是否和反應(yīng)試劑匹配,溶液的pH值很重要,與過(guò)氧化物酶底物匹配的溶液中不應(yīng)含有疊氮鈉。
⑨ 檢查復(fù)染劑和封片劑是否和所使用的色原匹配。
弱陽(yáng)性
如果陰性對(duì)照沒(méi)有染色而陽(yáng)性對(duì)照標(biāo)本弱陽(yáng)性,除了考慮上述因素外,還應(yīng)考慮:
① 標(biāo)本的固定方式,不當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞交蚬潭〞r(shí)溫度過(guò)高,都會(huì)影響到所檢測(cè)的抗原的數(shù)量和質(zhì)量。
② 不適當(dāng)?shù)目乖迯?fù)方式,由于石蠟切片在制作的過(guò)程中固定劑對(duì)抗原的封閉作用,必須用抗原熱修復(fù)或酶消化或兩種同時(shí)使用的抗原雙暴露法,至于使用哪一種方法,應(yīng)參照**廠家的說(shuō)明,同時(shí)結(jié)合標(biāo)本的具體情況而定。
③ 抗體的稀釋度是否過(guò)高或者孵育的溫度/時(shí)間是否正確。一般試劑**廠家都會(huì)對(duì)試劑給出一定的使用范圍,但是由于使用者的標(biāo)本來(lái)自各種組織,處理過(guò)程也不盡相同,所以應(yīng)參照使用范圍,對(duì)所使用的一抗進(jìn)行梯度測(cè)試,找出佳的使用濃度。
④ 切片上了過(guò)多的沖洗液,當(dāng)抗體加至切片上時(shí),等于人為地對(duì)抗體進(jìn)行了進(jìn)一步的稀釋。
⑤ 孵育時(shí)切片是否放置水平,否則會(huì)導(dǎo)致抗體流失。
如果陰性對(duì)照沒(méi)有反應(yīng),陽(yáng)性對(duì)照反應(yīng)良好,而標(biāo)本弱陽(yáng)性,則可能是由于陽(yáng)性對(duì)照不是同一種咨詢組織、或固定方式不同等原因所致。
Anti-Phospho-Rb (Ser608) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgM Whole serum 兔抗羊IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體 IGF-IIBP3 0.2ml
Goat Anti-Bovine IgG 羊抗IgG 1mg
FANCC 英文名稱: 范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Pyk2 (Tyr881) 0酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgM Whole serum 兔抗羊IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
Anti-CEA/Gold 膠體金離子標(biāo)記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(檢測(cè))IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
E2F6 轉(zhuǎn)錄因子E2F-6抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
水通道蛋白-5抗體 Anti-AQP5 0.1ml
ZBTB22 英文名稱: 鋅指蛋白297抗體 0.2ml
Dishevelled 2 英文名稱: 蓬亂蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-ELk1(Ser383) 0酸化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 規(guī)格 0.1ml
E2F6 轉(zhuǎn)錄因子E2F-6抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-PBEF(NT)抗體兔損傷分子-1(rabbit Kim-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 67219-55-0 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7
兔素(Renin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Benzyl D-glutamate 2578-33-8 中文名:D-谷氨酸5-苯甲酯 分子式:C12H15NO4 度:98.0%
兔素(Renin)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Benzoylpentanoic acid 4144-62-1 中文名:5-苯甲?;焖?/span> 分子式:C12H14O3 度:98.0%
兔素(rabbit Renin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Aminosalicylic acid 中文名:4-氨基水楊酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
兔瘦素(rabbit Leptin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Hydroxymethylfurfural 中文名:5-羥甲基糠醛 分子式:C6H6O3 度:%