抗體的制備過(guò)程:
1. M Y原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為M Y原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有M Y原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. M Y動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. M Y血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. M Y血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. M Y血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 |
Anti-VEGFR2/FLK1抗體 |
規(guī) 格 |
0.1ml/100μg 0.2ml/200μg 1ml/1mg |
貨號(hào) |
BJ-K95862 |
英文名稱 Anti-VEGFR2/FLK1
中文名稱 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg 1ml/1mg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
別 名 CD309; CD309 antigen; Fetal liver kinase 1; FLK-1; FLK1; KDR; Kinase insert domain receptor (a type III receptor tyrosine kinase); Kinase insert domain receptor; KRD1; Ly73; Protein tyrosine kinase receptor FLK1; Protein-tyrosine kinase receptor flk-1; Tyrosine kinase growth factor receptor; Vascular endothelial growth factor receptor 2; VEGFR 2; VEGFR; VEGFR-2; VEGFR2; VGFR2_HUMAN.
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長(zhǎng)因子和 激酶和磷酸酶 細(xì)胞膜受體 血管內(nèi)皮細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 147kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human VEGFR2 N-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
對(duì)照/標(biāo)本無(wú)染色 產(chǎn)品僅用于科研
① 確認(rèn)是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時(shí)間。
③ 對(duì)照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測(cè)系統(tǒng)是否和一抗匹配,這一點(diǎn)是非常重要的。比如,如果一抗是兔來(lái)源的抗體,二抗一定要用抗兔的二抗來(lái)匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。
④ 檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。
⑤ 檢查抗體的有效期和保存條件,尤其是標(biāo)記了酶或熒光素的抗體,現(xiàn)在大多數(shù)試劑公司的抗體均要求在4~8℃條件下保存,應(yīng)避免反復(fù)凍融,試劑保存時(shí)一定要避免與揮發(fā)性有機(jī)溶劑同放一室,以免降低抗體的效價(jià)。
⑥ 檢查標(biāo)本的儲(chǔ)存條件,好用已知陽(yáng)性的標(biāo)本來(lái)同時(shí)做陽(yáng)性對(duì)照。
⑦ 檢查色原/底物溶液,簡(jiǎn)單的檢測(cè)方法是將一滴標(biāo)記有酶的抗體加入到制備好的底物溶液中,如果底物發(fā)生預(yù)期的顏色變化,則可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后應(yīng)在一定時(shí)間內(nèi)用完,否則會(huì)失效。
⑧ 檢查沖洗液是否和反應(yīng)試劑匹配,溶液的pH值很重要,與過(guò)氧化物酶底物匹配的溶液中不應(yīng)含有疊氮鈉。
⑨ 檢查復(fù)染劑和封片劑是否和所使用的色原匹配。
弱陽(yáng)性
如果陰性對(duì)照沒(méi)有染色而陽(yáng)性對(duì)照標(biāo)本弱陽(yáng)性,除了考慮上述因素外,還應(yīng)考慮:
① 標(biāo)本的固定方式,不當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞交蚬潭〞r(shí)溫度過(guò)高,都會(huì)影響到所檢測(cè)的抗原的數(shù)量和質(zhì)量。
② 不適當(dāng)?shù)目乖迯?fù)方式,由于石蠟切片在制作的過(guò)程中固定劑對(duì)抗原的封閉作用,必須用抗原熱修復(fù)或酶消化或兩種同時(shí)使用的抗原雙暴露法,至于使用哪一種方法,應(yīng)參照**廠家的說(shuō)明,同時(shí)結(jié)合標(biāo)本的具體情況而定。
③ 抗體的稀釋度是否過(guò)高或者孵育的溫度/時(shí)間是否正確。一般試劑**廠家都會(huì)對(duì)試劑給出一定的使用范圍,但是由于使用者的標(biāo)本來(lái)自各種組織,處理過(guò)程也不盡相同,所以應(yīng)參照使用范圍,對(duì)所使用的一抗進(jìn)行梯度測(cè)試,找出佳的使用濃度。
④ 切片上了過(guò)多的沖洗液,當(dāng)抗體加至切片上時(shí),等于人為地對(duì)抗體進(jìn)行了進(jìn)一步的稀釋。
⑤ 孵育時(shí)切片是否放置水平,否則會(huì)導(dǎo)致抗體流失。
如果陰性對(duì)照沒(méi)有反應(yīng),陽(yáng)性對(duì)照反應(yīng)良好,而標(biāo)本弱陽(yáng)性,則可能是由于陽(yáng)性對(duì)照不是同一種咨詢組織、或固定方式不同等原因所致。
Anti-mu Opioid receptor/FITC 熒光素標(biāo)記μ-型受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-monkey IgM/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗猴IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體 Anti-CEAcam8/CD67 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml
FAM96B 英文名稱: FAM96B蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PKN2 蛋白激酶N2抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-monkey IgM/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗猴IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-Synaptotagmin-4/FITC 熒光素標(biāo)記突觸結(jié)合蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關(guān)基因(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
P-鈣粘附分子抗體 Anti-P-cadherin 0.1ml
SCGB3A1 英文名稱: 結(jié)合珠蛋白家族3A1抗體 0.2ml
ETV6 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子ETV6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NF1(Ser2817) 0酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體 規(guī)格 0.1ml
ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關(guān)基因(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-VEGFR2/FLK1抗體兔緊張素II(rabbit Angiotensin-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 6,6'-Di-O-sinapoylsucrose 1068661-35-7 中文名:6,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19
兔緊張素Ⅱelisa試劑盒 兔緊張素Ⅱ試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔緊張素Ⅱ試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔緊張素Ⅱ試劑盒、兔緊張素Ⅱ elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Benzyloxyindole 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO
兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Benzyl-1H-tetrazole 中文名:5-芐基-1H-四唑 分子式:C8H8N4O
兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-O-Ethylcleroindicin D 中文名: 分子式:C10H16O4 度:%
兔心脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit H-FABP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S