抗體的制備過程:
1. M Y原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為M Y原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有M Y原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. M Y動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. M Y血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. M Y血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. M Y血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 |
Anti-Synaptogyrin 3抗體 |
規(guī) 格 |
0.2ml/200μg |
貨號 |
BJ-K95609 |
英文名稱 Anti-Synaptogyrin 3
中文名稱 神經(jīng)細(xì)胞囊泡循環(huán)蛋白3抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
別 名 SNG3_HUMAN; Synaptogyrin 3; Synaptogyrin-3; Synaptogyrin3; SYNGR 3; SYNGR3; SYNGR-3; MGC:20003; MGC20003; OTTHUMP00000158899.
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 25kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Synaptogyrin 3
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
對照/標(biāo)本無染色 產(chǎn)品僅用于科研
① 確認(rèn)是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時間。
③ 對照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測系統(tǒng)是否和一抗匹配,這一點(diǎn)是非常重要的。比如,如果一抗是兔來源的抗體,二抗一定要用抗兔的二抗來匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。
④ 檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。
⑤ 檢查抗體的有效期和保存條件,尤其是標(biāo)記了酶或熒光素的抗體,現(xiàn)在大多數(shù)試劑公司的抗體均要求在4~8℃條件下保存,應(yīng)避免反復(fù)凍融,試劑保存時一定要避免與揮發(fā)性有機(jī)溶劑同放一室,以免降低抗體的效價。
⑥ 檢查標(biāo)本的儲存條件,好用已知陽性的標(biāo)本來同時做陽性對照。
⑦ 檢查色原/底物溶液,簡單的檢測方法是將一滴標(biāo)記有酶的抗體加入到制備好的底物溶液中,如果底物發(fā)生預(yù)期的顏色變化,則可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后應(yīng)在一定時間內(nèi)用完,否則會失效。
⑧ 檢查沖洗液是否和反應(yīng)試劑匹配,溶液的pH值很重要,與過氧化物酶底物匹配的溶液中不應(yīng)含有疊氮鈉。
⑨ 檢查復(fù)染劑和封片劑是否和所使用的色原匹配。
弱陽性
如果陰性對照沒有染色而陽性對照標(biāo)本弱陽性,除了考慮上述因素外,還應(yīng)考慮:
① 標(biāo)本的固定方式,不當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞交蚬潭〞r溫度過高,都會影響到所檢測的抗原的數(shù)量和質(zhì)量。
② 不適當(dāng)?shù)目乖迯?fù)方式,由于石蠟切片在制作的過程中固定劑對抗原的封閉作用,必須用抗原熱修復(fù)或酶消化或兩種同時使用的抗原雙暴露法,至于使用哪一種方法,應(yīng)參照生產(chǎn)廠家的說明,同時結(jié)合標(biāo)本的具體情況而定。
③ 抗體的稀釋度是否過高或者孵育的溫度/時間是否正確。一般試劑生產(chǎn)廠家都會對試劑給出一定的使用范圍,但是由于使用者的標(biāo)本來自各種組織,處理過程也不盡相同,所以應(yīng)參照使用范圍,對所使用的一抗進(jìn)行梯度測試,找出佳的使用濃度。
④ 切片上了過多的沖洗液,當(dāng)抗體加至切片上時,等于人為地對抗體進(jìn)行了進(jìn)一步的稀釋。
⑤ 孵育時切片是否放置水平,否則會導(dǎo)致抗體流失。
如果陰性對照沒有反應(yīng),陽性對照反應(yīng)良好,而標(biāo)本弱陽性,則可能是由于陽性對照不是同一種咨詢組織、或固定方式不同等原因所致。
Anti-SSTR5/FITC 熒光素標(biāo)記生長抑素受體5(SSTR5)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
beta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 Anti-PEPT1 0.1ml
SLC25A13 英文名稱: 線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬酸/谷酸載體蛋白抗體 0.2ml
EPH receptor A4 英文名稱: 酪酸蛋白激酶A4抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MYPT1(Thr696) 0酸化肌球蛋酸酶抗體 規(guī)格 0.1ml
beta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-STAT1(pThr701)/FITC 熒光素標(biāo)記抗0酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM 小鼠抗人IgM (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
G蛋白偶聯(lián)受體-2抗體 Anti-GASR 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Bio 生物素標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
FKBP25 英文名稱: 肽基脯酸異構(gòu)酶酶FKBP25抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-SMC1 (Ser360) 0酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-human IgM 小鼠抗人IgM (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
Anti-Synaptogyrin 3抗體小鼠肝表達(dá)趨化因子(LEC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Dantron 中文名:1,8-二羥基蒽醌 分子式:C14H8O4 度:98.0%
小鼠甘油三酯脂肪酶 英文名稱: Mouse iglyceride Lipase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TGL Herbarin 中文名: 分子式:C16H16O6
小鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Dantron 中文名:1,8-二羥基蒽醌 分子式:C14H8O4
小鼠甘油三酯 英文名稱: Mouse iglyceride 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TG Herbarin 36379-67-6 中文名: 分子式:C16H16O6 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 萘醌; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠甘油 英文名稱: Mouse Glycerin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GLY Dantron 117-10-2 中文名:1,8-二羥基蒽醌 分子式:C14H8O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 掌葉大黃; 金雞納樹; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫