抗體的制備過程:
1. M Y原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為M Y原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有M Y原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. M Y動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. M Y血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. M Y血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. M Y血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 |
Anti-SIP1抗體 |
規(guī) 格 |
0.2ml/200μg |
貨號 |
BJ-K95539 |
英文名稱 Anti-SIP1
中文名稱 Smad蛋白相互作用蛋白1抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
別 名 Smad Interacting Protein 1 SIP 1; SIP1 SIP-1; Smad-interacting protein 1; SMADIP 1; SMADIP1; ZEB 2; ZEB2; ZEB2_HUMAN; Zfhx1b; ZFHX1B protein; Zfx1b; Zinc finger E box binding protein 2; Zinc finger E-box-binding homeobox 2; Zinc finger homeobox 1b; zinc finger homeobox protein 1; Zinc finger homeobox protein 1b.
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 干細(xì)胞 細(xì)胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 136kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SIP1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
對照/標(biāo)本無染色 產(chǎn)品僅用于科研
① 確認(rèn)是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時間。
③ 對照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測系統(tǒng)是否和一抗匹配,這一點是非常重要的。比如,如果一抗是兔來源的抗體,二抗一定要用抗兔的二抗來匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。
④ 檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。
⑤ 檢查抗體的有效期和保存條件,尤其是標(biāo)記了酶或熒光素的抗體,現(xiàn)在大多數(shù)試劑公司的抗體均要求在4~8℃條件下保存,應(yīng)避免反復(fù)凍融,試劑保存時一定要避免與揮發(fā)性有機溶劑同放一室,以免降低抗體的效價。
⑥ 檢查標(biāo)本的儲存條件,好用已知陽性的標(biāo)本來同時做陽性對照。
⑦ 檢查色原/底物溶液,簡單的檢測方法是將一滴標(biāo)記有酶的抗體加入到制備好的底物溶液中,如果底物發(fā)生預(yù)期的顏色變化,則可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后應(yīng)在一定時間內(nèi)用完,否則會失效。
⑧ 檢查沖洗液是否和反應(yīng)試劑匹配,溶液的pH值很重要,與過氧化物酶底物匹配的溶液中不應(yīng)含有疊氮鈉。
⑨ 檢查復(fù)染劑和封片劑是否和所使用的色原匹配。
弱陽性
如果陰性對照沒有染色而陽性對照標(biāo)本弱陽性,除了考慮上述因素外,還應(yīng)考慮:
① 標(biāo)本的固定方式,不當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞交蚬潭〞r溫度過高,都會影響到所檢測的抗原的數(shù)量和質(zhì)量。
② 不適當(dāng)?shù)目乖迯?fù)方式,由于石蠟切片在制作的過程中固定劑對抗原的封閉作用,必須用抗原熱修復(fù)或酶消化或兩種同時使用的抗原雙暴露法,至于使用哪一種方法,應(yīng)參照**廠家的說明,同時結(jié)合標(biāo)本的具體情況而定。
③ 抗體的稀釋度是否過高或者孵育的溫度/時間是否正確。一般試劑**廠家都會對試劑給出一定的使用范圍,但是由于使用者的標(biāo)本來自各種組織,處理過程也不盡相同,所以應(yīng)參照使用范圍,對所使用的一抗進(jìn)行梯度測試,找出佳的使用濃度。
④ 切片上了過多的沖洗液,當(dāng)抗體加至切片上時,等于人為地對抗體進(jìn)行了進(jìn)一步的稀釋。
⑤ 孵育時切片是否放置水平,否則會導(dǎo)致抗體流失。
如果陰性對照沒有反應(yīng),陽性對照反應(yīng)良好,而標(biāo)本弱陽性,則可能是由于陽性對照不是同一種咨詢組織、或固定方式不同等原因所致。
Anti-ULBP3/N2DL3/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ZCWCC1(Zinc finger CW-type coiled-coil domain protein 1) ZCWCC1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CBX5抗體 Anti-CBX5 0.1ml
SV2B 英文名稱: 突觸泡蛋白2B抗體 0.2ml
ELL 英文名稱: 聚合酶延伸因子抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Histone H2A.X (Tyr143) 0酸化組蛋白H2AX抗體 規(guī)格 0.1ml
ZCWCC1(Zinc finger CW-type coiled-coil domain protein 1) ZCWCC1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-OVA/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗雞卵白蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
胸腺肽 α-1抗體 Anti-Thymosin α-1 0.1ml
S100 alpha 2 英文名稱: S100A2抗體 0.2ml
EAAT3 英文名稱: 膠質(zhì)細(xì)胞谷酸運載蛋白3抗體(神經(jīng)/上皮細(xì)胞谷酸運載蛋白) 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-KSR1 (Ser392) 0酸化Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-SIP1抗體小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Empagliflozin 中文名:依帕列凈 分子式:C23H27ClO7
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Empagliflozin 864070-44-0 中文名:依帕列凈 分子式:C23H27ClO7 度:95.0%
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISAKit ELISA. 96T/48T Clopidogrel bisulfate 135046-48-9 中文名:硫酸氫氯吡格雷 分子式:C16H18ClNO6S2
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Empagliflozin 864070-44-0 中文名:依帕列凈 分子式:C23H27ClO7
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISAKit ELISA. 96T/48T Emodin 中文名:大黃素 分子式:C15H10O5 度:99.0%