抗體的制備過程:
1. M Y原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為M Y原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有M Y原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. M Y動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. M Y血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. M Y血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. M Y血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 |
Anti-WSTF抗體 |
規(guī) 格 |
0.2ml/200μg |
貨號 |
BJ-K95337 |
英文名稱 Anti-WSTF
中文名稱 轉(zhuǎn)錄因子WSTF抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
別 名 BAZ1B; BAZ1B_HUMAN; Bromodomain adjacent to zinc finger domain protein 1B; hWALP 2; hWALP-2; hWALP2; transcription factor WSTF; Tyrosine-protein kinase BAZ1B; WALP-2; WALP2; WBRS 9; WBRS-9; WBRS9; WBSC 10; WBSC-10; WBSC10; Williams Beuren syndrome chromosome region 9 protein; Williams syndrome transcription factor; Williams-Beuren syndrome chromosomal region 10 protein; Williams-Beuren syndrome chromosomal region 9 protein antibody.
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 染色質(zhì)和核信號 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 171kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human WSTF
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
對照/標(biāo)本無染色 產(chǎn)品僅用于科研
① 確認(rèn)是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時(shí)間。
③ 對照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測系統(tǒng)是否和一抗匹配,這一點(diǎn)是非常重要的。比如,如果一抗是兔來源的抗體,二抗一定要用抗兔的二抗來匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。
④ 檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。
⑤ 檢查抗體的有效期和保存條件,尤其是標(biāo)記了酶或熒光素的抗體,現(xiàn)在大多數(shù)試劑公司的抗體均要求在4~8℃條件下保存,應(yīng)避免反復(fù)凍融,試劑保存時(shí)一定要避免與揮發(fā)性有機(jī)溶劑同放一室,以免降低抗體的效價(jià)。
⑥ 檢查標(biāo)本的儲(chǔ)存條件,好用已知陽性的標(biāo)本來同時(shí)做陽性對照。
⑦ 檢查色原/底物溶液,簡單的檢測方法是將一滴標(biāo)記有酶的抗體加入到制備好的底物溶液中,如果底物發(fā)生預(yù)期的顏色變化,則可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后應(yīng)在一定時(shí)間內(nèi)用完,否則會(huì)失效。
⑧ 檢查沖洗液是否和反應(yīng)試劑匹配,溶液的pH值很重要,與過氧化物酶底物匹配的溶液中不應(yīng)含有疊氮鈉。
⑨ 檢查復(fù)染劑和封片劑是否和所使用的色原匹配。
弱陽性
如果陰性對照沒有染色而陽性對照標(biāo)本弱陽性,除了考慮上述因素外,還應(yīng)考慮:
① 標(biāo)本的固定方式,不當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞交蚬潭〞r(shí)溫度過高,都會(huì)影響到所檢測的抗原的數(shù)量和質(zhì)量。
② 不適當(dāng)?shù)目乖迯?fù)方式,由于石蠟切片在制作的過程中固定劑對抗原的封閉作用,必須用抗原熱修復(fù)或酶消化或兩種同時(shí)使用的抗原雙暴露法,至于使用哪一種方法,應(yīng)參照**廠家的說明,同時(shí)結(jié)合標(biāo)本的具體情況而定。
③ 抗體的稀釋度是否過高或者孵育的溫度/時(shí)間是否正確。一般試劑**廠家都會(huì)對試劑給出一定的使用范圍,但是由于使用者的標(biāo)本來自各種組織,處理過程也不盡相同,所以應(yīng)參照使用范圍,對所使用的一抗進(jìn)行梯度測試,找出佳的使用濃度。
④ 切片上了過多的沖洗液,當(dāng)抗體加至切片上時(shí),等于人為地對抗體進(jìn)行了進(jìn)一步的稀釋。
⑤ 孵育時(shí)切片是否放置水平,否則會(huì)導(dǎo)致抗體流失。
如果陰性對照沒有反應(yīng),陽性對照反應(yīng)良好,而標(biāo)本弱陽性,則可能是由于陽性對照不是同一種咨詢組織、或固定方式不同等原因所致。
Anti-IQGAP1/FITC 熒光素標(biāo)記支架蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC 熒光素標(biāo)記SARS抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANKRD13B 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
D4 GDI 英文名稱: 轉(zhuǎn)移抑制基因GDIA2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格 0.1ml
Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC 熒光素標(biāo)記SARS抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-PAR4/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白酶活化受體4/前列腺細(xì)胞凋亡反應(yīng)蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rb Anti-FITC/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗FITCMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
細(xì)胞角蛋白抗體 Anti-Cytokeratin 0.1ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
FAM89B 英文名稱: 病毒受體同源蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Tuberin/TSC2(Ser1420) 0酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rb Anti-FITC/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗FITCMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
Anti-WSTF抗體內(nèi)皮生長因子 165(VEGF165) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside 中文名: 分子式:C56H90O19
內(nèi)皮生長因子 (VEGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Androstanolone 17-benzoate 中文名:雄諾龍苯甲酸酯 分子式:C26H34O3 度:98.0%
緊張素轉(zhuǎn)化酶 英文名稱: Angiotensin Conveing Enzyme 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ACE Otophylloside B 中文名:青陽參苷B 分子式:C49H78O16 度:97.0%
緊張素I(素、AngI) 96T/48T Ornidazole 中文名:奧硝唑 分子式:C7H10ClN3O3 度:98.0%
緊張素Ⅱ一型受體抗原 英文名稱: Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen 英文縮寫: AT1R 規(guī)格: 48T/96T Ophiopogonin D 中文名:麥冬皂苷D 分子式:C44H70O16 度:%