抗體的制備過程:
1. M Y原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為M Y原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有M Y原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. M Y動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. M Y血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. M Y血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. M Y血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 |
Anti-VDAC抗體 |
規(guī) 格 |
0.2ml/200μg |
貨號(hào) |
BJ-K95329 |
英文名稱 Anti-VDAC
中文名稱 等電壓依賴性陰離子通道抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
別 名 voltage-dependent anion channel; hVDAC1; MGC111064; Outer mitochondrial membrane protein porin 1; Plasmalemmal porin; Porin 31 HL; Porin 31HL; Porin 31HM; VDAC 1; VDAC; VDAC1; Voltage dependent anion channel 1; Voltage dependent anion selective channel protein 1; VTA1_HUMAN.
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 學(xué) 細(xì)胞凋亡 通道蛋白 線粒體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 32kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human VDAC C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
對(duì)照/標(biāo)本無染色 產(chǎn)品僅用于科研
① 確認(rèn)是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時(shí)間。
③ 對(duì)照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測系統(tǒng)是否和一抗匹配,這一點(diǎn)是非常重要的。比如,如果一抗是兔來源的抗體,二抗一定要用抗兔的二抗來匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。
④ 檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。
⑤ 檢查抗體的有效期和保存條件,尤其是標(biāo)記了酶或熒光素的抗體,現(xiàn)在大多數(shù)試劑公司的抗體均要求在4~8℃條件下保存,應(yīng)避免反復(fù)凍融,試劑保存時(shí)一定要避免與揮發(fā)性有機(jī)溶劑同放一室,以免降低抗體的效價(jià)。
⑥ 檢查標(biāo)本的儲(chǔ)存條件,好用已知陽性的標(biāo)本來同時(shí)做陽性對(duì)照。
⑦ 檢查色原/底物溶液,簡單的檢測方法是將一滴標(biāo)記有酶的抗體加入到制備好的底物溶液中,如果底物發(fā)生預(yù)期的顏色變化,則可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后應(yīng)在一定時(shí)間內(nèi)用完,否則會(huì)失效。
⑧ 檢查沖洗液是否和反應(yīng)試劑匹配,溶液的pH值很重要,與過氧化物酶底物匹配的溶液中不應(yīng)含有疊氮鈉。
⑨ 檢查復(fù)染劑和封片劑是否和所使用的色原匹配。
弱陽性
如果陰性對(duì)照沒有染色而陽性對(duì)照標(biāo)本弱陽性,除了考慮上述因素外,還應(yīng)考慮:
① 標(biāo)本的固定方式,不當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞交蚬潭〞r(shí)溫度過高,都會(huì)影響到所檢測的抗原的數(shù)量和質(zhì)量。
② 不適當(dāng)?shù)目乖迯?fù)方式,由于石蠟切片在制作的過程中固定劑對(duì)抗原的封閉作用,必須用抗原熱修復(fù)或酶消化或兩種同時(shí)使用的抗原雙暴露法,至于使用哪一種方法,應(yīng)參照**廠家的說明,同時(shí)結(jié)合標(biāo)本的具體情況而定。
③ 抗體的稀釋度是否過高或者孵育的溫度/時(shí)間是否正確。一般試劑**廠家都會(huì)對(duì)試劑給出一定的使用范圍,但是由于使用者的標(biāo)本來自各種組織,處理過程也不盡相同,所以應(yīng)參照使用范圍,對(duì)所使用的一抗進(jìn)行梯度測試,找出佳的使用濃度。
④ 切片上了過多的沖洗液,當(dāng)抗體加至切片上時(shí),等于人為地對(duì)抗體進(jìn)行了進(jìn)一步的稀釋。
⑤ 孵育時(shí)切片是否放置水平,否則會(huì)導(dǎo)致抗體流失。
如果陰性對(duì)照沒有反應(yīng),陽性對(duì)照反應(yīng)良好,而標(biāo)本弱陽性,則可能是由于陽性對(duì)照不是同一種咨詢組織、或固定方式不同等原因所致。
OJ/IleRS(Human anti-OJ-antibody) ELISA Kit 人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-PLC gamma 2 (Tyr1217) 0酸化0酯酶Cγ2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HHV8/ORF50 人類皰疹病毒8抗體 規(guī)格 0.2ml
ENA-78/CXCL5 ELISA Kit 大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78 96T
Classical swine fever virus 英文名稱: 抗病毒抗體 0.2ml
C20orf26 英文名稱: 20號(hào)染色體開放閱讀框26抗體 0.2ml
Anti-Phospho-PLC gamma 2 (Tyr1217) 0酸化0酯酶Cγ2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-JNK1/2/3/FITC 熒光素標(biāo)記抗氨基末端激酶1/2/3抗體 IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Recomb Protein A/Gold 金標(biāo)記重組蛋白A(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
叉頭蛋白3-T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子 Anti-FoxP3 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/PE PE標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
FMO5 英文名稱: 二甲基苯胺單加氧酶5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-STAT3 (Ser727) 0酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體 規(guī)格 0.1ml
Recomb Protein A/Gold 金標(biāo)記重組蛋白A(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
Anti-VDAC抗體血清鐵檢測 Copper blue protein (CP) detection β-Anhydrouzarigenin 中文名: 分子式:C23H32O3
血清鐵蛋白 英文名稱: ferritin in serum 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SF 4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide 52298-44-9 中文名:4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺 分子式:C14H16N2O4S
血清鐵 英文名稱: Human serum Lron 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Lron Paroxetine 中文名:鹽酸帕羅西汀 分子式:C19H21ClFNO3 度:99.0%
血清高密度脂蛋白(HDL)測試盒 HCV test kit p-Anisoin 中文名:對(duì)茴香偶姻 分子式:C16H16O4
血清淀粉樣蛋白 (SAA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Paris Saponin VII 中文名:重樓皂苷VII 分子式:C51H82O21 度:98.0%