細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
商品屬性:
產品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
VERO;非洲綠猴腎細胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X86446 |
細胞名稱 非洲綠猴腎細胞;VERO
形態(tài)特性 上皮樣,多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 Vero細胞株是日本千葉大學的Yasumura Y和Kawakita Y從正常成年非洲綠猴的腎臟組織中分離建立的。該細胞常作為轉染宿主,用于支原體的檢測。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細胞STR鑒定服務流程:
Dimethylolurea 中文名:雙羥甲脲 分子式:C3H8N2O3 度:98.0% 小鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒
4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene 中文名:4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪 分子式:C28H18N2O2 度:98.0% 小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
1,4-Bis(2-benzoxazolyl)naphthalene 中文名:1,4-雙(2-苯并惡唑基)萘 分子式:C24H14N2O2 度:98.0% 小鼠白介素35(IL-35)ELISA試劑盒
4,4'-Diaminodiphenylsulfone 中文名:4,4'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S 度:98.0% 小鼠白介素-33(IL-33)ELISA試劑盒
9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene 中文名:9,9-雙(4-羥苯基)芴 分子式:C25H18O2 度:98.0% 小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒硫酸鋰一水(分子生物學級) Lithium sulfate monohydrate 質量規(guī)格:>98%,分子生物學級 Rat thyroxine (T4) ELISA Kit 大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
L-蘇糖酸鈣(>99%,BR)
L-Threonic acid calcium salt 質量規(guī)格:>99%,BR HumanChromogranin,CgAELISAKit 人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
L-酪氨酸二鈉鹽(>98%,BC)
L-Tyrosine di salt hydrate 質量規(guī)格:>98%,BC Human5-Hydroxyyptamine,5HTELISA試劑盒人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
魯米諾鈉(>98%,BS) Luminol,
salt 質量規(guī)格:>98%,BS 格蘭-韋革氏(Gram-Weige)染色試劑盒50
-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)
Magenta-Gal 質量規(guī)格:>98%,BR MouseAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)
Magenta-Gal 質量規(guī)格:>98%,BR 小鼠腦啡肽原B(PDYN)ELISA試劑盒 ,英文名: PDYN ELISA Kit
檸檬酸鎂九水(>98%,BR) Magnesium
nonahydrate 質量規(guī)格:>98%,BR 大鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA檢測試劑盒RatphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit
96T/48T
十二烷基硫酸鎂(分子生物學) Magnesium dodecyl sulfate 質量規(guī)格:>85%,分子生物學級 人多萜長醇二0酸寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉移酶(DDOST/OST-48)試劑盒 Human DDOST ELISA Kit
氟化鎂(>98%,BR) Magnesium fluoride 質量規(guī)格:>98%,BR
Ratmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAKit大鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氫氧化鎂(>99%,BR) Magnesium hydroxide 質量規(guī)格:>99%,BR
DMEM培養(yǎng)基1/10升(片劑)柯里拉京(標準品)
Corilagin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗**/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒 ,英文名: ADH/VP/AVP ELISA Kit
人參皂苷F3(標準品) Ginsenoside F3 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗繆勒管(AMH)ELISA試劑盒 ,英文名: AMH ELISA Kit
槐定堿(標準品) Sophoridine 質量規(guī)格:HPLC≥96.50%,標準品 小鼠抗內皮細胞抗體(AECA)ELIS
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞產品僅用于科研
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
VERO;非洲綠猴腎細胞采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。