細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 家兔皮膚來源細(xì)胞；家兔皮膚來源細(xì)胞
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一只出生三天的雌性家兔的耳皮膚組織。由中科院昆明細(xì)胞庫于2014年建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
家兔皮膚來源細(xì)胞 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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貨號 |
BJ-01X86352 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Abiraterone
acetate 中文名：乙酸阿比特龍酯 分子式：C26H33NO2 度：98.0% 肝素抗凝管 Heparin aicoagula tube
Esomeprazole 中文名：埃索美拉唑鈉 分子式：C17H19N3NaO3S 度：98.0% 脫脂奶粉 100g
Clevidipine
butyrate 中文名：丁酸氯維地平 分子式：C21H23Cl2NO6 度：98.0% Skimmilk
500g
Azilsartan 中文名：阿齊沙坦 分子式：C25H20N4O5 度：98.0% 超氧化物歧化酶 30KU
1-Methyl-5-amino-1H-benzimidazole-2-butanoic
acid ethyl ester 中文名： 分子式：C14H19N3O2 度：98.0% SOD 3KUN-硝基-L-精氨酸甲酯 N'-Nitro-L-arginine-methyl
ester 質(zhì)量規(guī)格：>98%
Ratphospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit大鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
N-苯甲酰-L-酪氨酸乙酯(BTEE)
N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester 質(zhì)量規(guī)格：>98% GPDGP(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
AEBSF絲氨酸抑制劑 AEBSF HCl 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
MouseSubstanceP,SPELISA試劑盒小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
AEBSF(進(jìn)分) AEBSF HCl 質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分TCI A2215 小鼠顆粒酶A(GZMA)ELISA試劑盒 ，英文名： GZMA ELISA Kit
鹽酸貝他定(進(jìn)口) Bestatin HCl 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,美國進(jìn)口 人芳香烴受體(AhR)ELISA檢測試劑盒Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit
96T/48T
鄰菲啰啉鹽酸鹽，一水
1,10-Phenanthroline
monohydrate 質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 Rat
Serum amyloid A,SAA ELISA Kit
膦酰二肽鈉
Phosphoramidon di salt 質(zhì)量規(guī)格：0.99 英文名稱RatLPSELISAKit大鼠脂多糖(LPS)規(guī)格：96T/48T
癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷 Decyl β-D-glucopyranoside 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20
德羅特韋(GSK-1349572,DTG) Dolutegravir,GSK1349572 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
ELISAKitfPSA人游離前列腺特異性抗原規(guī)格：48T/96T
十二烷基吡喃葡萄糖苷；月桂酰基喃葡萄糖
Dodecyl glucopyranoside 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒 ，英文名： EMAb ELISA Kit谷氨酸單鈉鹽 HPLC≥98% 50mg ELISAKitacetone山羊同檢測規(guī)格：48T/96T
骨化二醇 HPLC≥98% 20mg
ELISAKitACE人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶規(guī)格：48T/96T
骨化二醇 HPLC≥98% 10mg
ELISAKitAChRab人乙酰膽堿受體抗體規(guī)格：48T/96T
瓜子金皂苷V HPLC≥95% 20mg
ELISAKitACH人乙酰膽堿規(guī)格：48T/96T
瓜子金皂苷己 HPLC≥98% 20mg
ELISAKitACO-2人烏頭酸酶2規(guī)格：48T/96T
關(guān)
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.家兔皮膚來源細(xì)胞研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。