細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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CHO-K1；中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆) |
貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X86316 |
細(xì)胞名稱 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆)；CHO-K1
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 1957年，Puck TT從成年中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細(xì)胞，CHO-K1是CHO的一個(gè)亞克隆。CHO-K1的生長(zhǎng)需要脯氨酸。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1：3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
N,N-dimethyl-2-Quinoxalinamine 中文名： 分子式：C10H11N3 度：98.0% 兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒
2-Hydroxyquinoxaline 中文名： 分子式：C8H6N2O 度：98.0% 兔子視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒
Sulfaquinoxaline 中文名：磺胺喹噁啉 分子式：C14H12N4O2S 度：98.0% 兔子髓0脂堿性蛋白elisa試劑盒 兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒、兔子髓0脂堿性蛋白eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
Metamizole 中文名：安乃近 分子式：C13H16N3NaO4S 度：98.0% 兔子視黃醇結(jié)合蛋白4elisa試劑盒 兔子視黃醇結(jié)合蛋白4試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔子視黃醇結(jié)合蛋白4試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子視黃醇結(jié)合蛋白4試劑盒、兔子視黃醇結(jié)合蛋白4eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
Valsartan 中文名：纈沙坦 分子式：C24H29N5O3 度：99.0% 兔子透明質(zhì)酸elisa試劑盒 兔子透明質(zhì)酸試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔子透明質(zhì)酸試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子透明質(zhì)酸試劑盒、兔子透明質(zhì)酸eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。丙谷二肽,L-丙-谷二肽,力肽
Ala-Gln 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor,VEGFR-3/Flt-4ELISA試劑盒小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L-精氨酸甲酯二鹽酸 H-Arg-OMe·2HCl 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒 ，英文名： MIP-1β/CCL4 ELISA
Kit
D-丙氨酰胺鹽酸鹽 D-Alaninamide 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAquaporin1,AQP-1ELISAKit
96T/48T
硝酸芬替康唑; 硝酸芬康唑 Fenticonazole Nitrate 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人催乳素釋放(PRH)試劑盒 Human
PRH ELISA Kit
1-芐基D-谷氨酸
1-Benzyl D-Glutamate 質(zhì)量規(guī)格：0.98 RaeninELISAKit大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
D-苯丙氨酸
D-Phenylalanine 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR HIS釣餌(PULLDOWN)檢測(cè)試劑盒5
D-丙氨酸 D-Alanine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA試劑盒小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
β-丙氨酸 β-Alanine 質(zhì)量規(guī)格：>98% 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA試劑盒 ，英文名： MIP1β ELISA
Kit
β-丙氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品) β-Alanine 質(zhì)量規(guī)格：>98%(T),標(biāo)準(zhǔn)品 人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA檢測(cè)試劑盒Humannicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit
96T/48T
D-色氨酸
D-Tryptophan 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠血管**素樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒 Rat Angiopoietin-like 3,ANGPTL3 ELISA KIT氟蟲脲(標(biāo)準(zhǔn)品) Flufenoxuron 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98% 牛轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)試劑盒 Bovine ansforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit
氟磺胺草醚(標(biāo)準(zhǔn)品) Fomesafen 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5% 牛轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)試劑盒 Bovine ansforming growth factors β2,TGFβ2 ELISA Kit
氟酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Flutolanil 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
CHO-K1；中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆)采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。