細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（亞系克?。?span>CHO-HCV-NS4A
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 CHO-HCV-NS4A細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的NS4A基因，能穩(wěn)定表達(dá)NS4A蛋白，是HCV基礎(chǔ)研究的極好摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham＇s F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C20
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
CHO-HCV-NS4A；中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（亞系克?。?/span> |
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生長(zhǎng)特性 |
貼壁生長(zhǎng) |
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貨號(hào) |
BJ-01X86281 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Echinoynethiophene
A 中文名： 分子式：C13H10O2S 度：98.5% 兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit
Allitol 中文名：蒜糖醇 分子式：C6H14O6 度：% 兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISAKit
2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol 中文名： 分子式：C42H85NO5 度：96.0% 兔纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISAKit
3-Methoxyfuran 中文名： 分子式：C5H6O2 度：99.0% 兔子白介素3(IL-3)ELISAKit
Soyacerebroside
I 中文名： 分子式：C40H75NO9 度：95.0% 兔子白介素1β(IL-1β)ELISAKit索非那新琥珀酸鹽 Solifenacin succinate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA檢測(cè)試劑盒Humangalactose-6-sulphatesulphatase,Gal-6SELISAKit
96T/48T
結(jié)晶紫
Crystal violet 質(zhì)量規(guī)格：BS 大鼠雄(ASD)試劑盒 Rat
Androstenedione,ASD ELISA Kit
結(jié)晶紫(進(jìn)口) Crystal violet 質(zhì)量規(guī)格：用于生化研究,進(jìn)口 英文名稱RatAmylinELISAKit大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
硝基四唑紫(INT)
Iodonitrotetrazolium chloride(INT) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 谷類纖維素酶解法定量檢測(cè)試劑盒10
乙基紫
Ethyl Violet 質(zhì)量規(guī)格：80%,進(jìn)分 ELISAKitPK人胰激肽原酶規(guī)格：48T/96T
酸性紫49
Acid Violet 49 質(zhì)量規(guī)格：IND,進(jìn)分 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF/FGF2)ELISA試劑盒 ，英文名： bFGF/FGF2 ELISA Kit
皂黃
Metanil yellow 質(zhì)量規(guī)格：AR 大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit
96T/48T
橙黃G；酸性橙10 Orange G 質(zhì)量規(guī)格：BS 人雌受體β(ESR2)試劑盒 Human Esogen receptor beta,ESR2 ELISA kit
橙黃Ⅱ
OrangeⅡ 質(zhì)量規(guī)格：AR Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISAKit大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
柯衣定
Chrysoidin 質(zhì)量規(guī)格：AR IKB-ALPHA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25二甲基亞砜(色譜級(jí)) Dimethyl
sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格：for
HPLC, ≥99.7% 酵母菌CSM-△LEU/△P培養(yǎng)基100毫升
N,N-二甲基乙酰胺(色譜級(jí))
N-N-Dimethylacetamide 質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.8%(GC) 酵母菌DOBA培養(yǎng)基100毫升
甘油(色譜級(jí)) Glycerol in water for HPLC verification 質(zhì)量規(guī)格：for
HPLC,≥99.5% 酵母菌DOB培養(yǎng)基100毫升
十二烷基基氯化胺[離子
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5CHO-HCV-NS4A；中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（亞系克?。?/span>.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。