細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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IE3A10C8E5；小鼠雜交瘤細(xì)胞 |
半貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X86201 |
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；IE3A10C8E5
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
1-Amino-4-hydroxyanthraquinone 116-85-8 中文名：1-氨基-4-羥基蒽醌 分子式：C14H9NO3
Baciacin 250KU
2-Amino-3-hydroxyanthraquinone 117-77-1 中文名：2-氨基-3-羥基蒽醌 分子式：C14H9NO3 糖元染液 Pap stain
(exfoliated cell staining)
6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic
acid 90-51-7 中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸 分子式：C10H9NO4S 蘇木素染液 Fast HE tissues and exfoliated cells of dye
4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic
acid 116-63-2 中文名：4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸 分子式：C10H9NO4S 伊紅染液 Gram stain
Peri acid 82-75-7 中文名：周位酸 分子式：C10H9NO3S H-E染液 Acid fast stain殼聚糖(M.W70w-100w)
Chitosan 質(zhì)量規(guī)格：脫乙酰度≥95%,,粘度100-200 mpa.s Rat lymphocyte chemotactic
factor (Lptn/LTN/XCL1) ELISA Kit 大鼠細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒
殼聚糖(M.W.10萬) Chitosan 質(zhì)量規(guī)格：脫乙酰度是80%，粘度800
humanfreechorionicgonadoopin,f-βhCGELISAKIT 人游離β絨毛膜促性腺(f-βhCG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
大蒜素，二烯丙基二硫
Allicin 質(zhì)量規(guī)格：>98%,油狀 Humanai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
α-香附酮 α-Cyperone 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 植物葡萄糖6-0酸異構(gòu)酶(glucose-6-phosphateisomerase;GPI)電泳分析試劑盒5
頭孢克洛(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefaclor 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Humanurokinase，UKELISAKit人尿激酶(UK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
頭孢克洛
Cefaclor 質(zhì)量規(guī)格：>98%,一水合,BR 小鼠回腸脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP6)ELISA試劑盒 ，英文名： FABP6 ELISA Kit
頭孢拉定
Cefradine 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanNa+/H+exchanger3,NHE3ELISAKit
96T/48T
頭孢拉定(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefradine 質(zhì)量規(guī)格：>95%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠胃動(dòng)素受體(MTLR)試劑盒 Rat Motilin Receptor,MTLR ELISA Kit
頭孢唑肟,頭孢唑肟酸 Ceftizoxime acid 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR 英文名稱RatCyclinD3ELISAKit大鼠細(xì)胞周期素D3(CyclinD3)規(guī)格：96T/48T
頭孢唑肟(標(biāo)準(zhǔn)品) Ceftizoxime acid 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20橙皮素
Hesperitin 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR 小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 96T/48T
青陽參苷元A（標(biāo)準(zhǔn)品） Qingyangshengenin A 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 ，英文名： Tn-Ⅰ ELISA Kit
青陽參苷元B（標(biāo)準(zhǔn)品） Qingyangshengenin B 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌鈣蛋白T()ELISA試劑盒 ，英文
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
IE3A10C8E5；小鼠雜交瘤細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。