細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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2E8E9E10F2；小鼠雜交瘤細(xì)胞 |
半貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X86182 |
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；2E8E9E10F2
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric
acid 1
1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene 34052-90-9 中文名：1,3-雙(4,5-二氫-2-惡唑)苯 分子式：C12H12N2O2 十六烷基基溴化胺 50g
4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 843-55-0 中文名：4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚 分子式：C18H20O2 CTAB
250g
2,2'-Dithiobisbenzanilide 135-57-9 中文名：2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫 分子式：C26H20N2O2S2 5’-三0酸胞苷三鹽
50mg
Dimethylolurea 140-95-4 中文名：雙羥甲脲 分子式：C3H8N2O3
CTP 100mg黃芪多糖(68%)
2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole 質(zhì)量規(guī)格：>68% 英文名稱RatCA199ELISAKit大鼠胃腸癌標(biāo)志物(CA199)規(guī)格：96T/48T
黃芪多糖(50%)
2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole 質(zhì)量規(guī)格：>50% 烘培食物尿素比色法定量檢測(cè)試劑盒20
黃芪多糖(30%)
2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole 質(zhì)量規(guī)格：>30%
ELISAKitHO-2人血紅素氧合酶2規(guī)格：48T/96T
3-奎寧環(huán)酮鹽酸鹽
3-Quinuclidinone HCl 質(zhì)量規(guī)格：>98% 小鼠花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒 ，英文名： AA ELISA Kit
伊索拉定
Irsogladine 質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR 大鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA檢測(cè)試劑盒RatComplemefragme3a,C3aELISAKit
96T/48T
ADA單鈉鹽 ADA mono
salt 質(zhì)量規(guī)格：>99% 人補(bǔ)體1抑制物抗體-IgM(C1INH-IgM)試劑盒 Human Compleme 1 inhibitor aoaibody-IgM,C1INH-IgM
ELISA Kit
N-（乙酰氨基）亞氨基二乙酸二鈉鹽 ADA di
salt 質(zhì)量規(guī)格：>98%
Ratansforminggrowthfactor-beta-stimulatedProteinclone-22,TSC22ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
ADA；N-(2-乙酰胺基)-2-亞氨基二乙酸 ADA 質(zhì)量規(guī)格：>99% MAYER蘇木素復(fù)染試劑盒50
(2S)-2-N-芴甲氧羰基氨基-2-甲基-6-庚烯酸 (S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine 質(zhì)量規(guī)格：>97%
PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISA試劑盒豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
潑尼松龍鈉
Prednisolone phosphate 質(zhì)量規(guī)格：>97%,USP 小鼠呼腸孤病毒3型抗體(RV-3 Ab)ELISA試劑盒丙谷二肽,L-丙-谷二肽,力肽 Ala-Gln 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人肝脂酶(HL)試劑盒 Human hepatic lipase,HL ELISA Kit
L-精氨酸甲酯二鹽酸 H-Arg-OMe·2HCl 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人桿狀病毒IAP重復(fù)包含蛋白2/3(BIRC2/3)試劑盒 Human BIRC2/3 ELISA Kit
D-丙氨酰胺鹽酸鹽 D-Alaninamide 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人干擾素a-抗體(Ai-IFN-ab)試劑盒 Human Ai-ie
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
2E8E9E10F2；小鼠雜交瘤細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。