細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號(hào) |
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C57/B6-S；小鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X86138 |
細(xì)胞名稱 小鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞；C57/B6-S
形態(tài)特性 成纖維樣細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一正常雄性C57/B6小鼠的皮膚組織。2013年由中科院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Oxymetholone
Mebendazole 31431-39-7 中文名：甲苯咪唑 分子式：C16H13N3O3 人信號(hào)素4D(SEMA4D)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human SEMA4D (Semaphorin 4D) ELISA Kit
8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic
acid 547-91-1 中文名：喹方 分子式：C9H6INO4S 人足盂蛋白(PCX)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human PCX
(Podocalyxin) ELISA Kit
Ornidazole 16773-42-5 中文名：奧硝唑 分子式：C7H10ClN3O3 人組織多肽抗原(TPA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Human TPA (Tissue Polypeptide Aigen) ELISA Kit
Tinidazole 19387-91-8 中文名：替硝唑 分子式：C8H13N3O4S 人組織多肽特異性抗原(TPS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Human TPS (Tissue Polypeptide Specific Aigen) ELISA Kit木蝴蝶苷B（標(biāo)準(zhǔn)品）
Oroxin B 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatAquaporin2ELISAKit大鼠水通道蛋白2(AQP2)規(guī)格：96T/48T
磷霉素氨丁三醇
Fosfomycin tromethamine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化妝品糖精(saccharin)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20
磷霉素氨丁三醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Fosfomycin tromethamine 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 ELISAKitANG-ⅠR人血管緊張素Ⅰ受體抗體規(guī)格：48T/96T
木犀草苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Cynaroside 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠過氧化還原酶1(PRDX1)ELISA試劑盒 ，英文名： PRDX1 ELISA Kit
木香烴內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Costundide 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人食欲素受體(OXR)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanOrexieceptor,OXRELISAKit
96T/48T
擬人參皂苷F11(標(biāo)準(zhǔn)品) Pseudoginsenoside F11 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠糖類抗原125(CA125)試劑盒 Rat
Carbonhydrate Aigen 125,CA125 ELISA Kit
擬人參皂苷RT5(標(biāo)準(zhǔn)品) Pseudoginsenoside RT5 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatAquaporin1ELISAKit大鼠水通道蛋白1(AQP1)ELISAKit規(guī)格：96T/48T
尿囊素（標(biāo)準(zhǔn)品）
Allantoin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 化妝品糖精(saccharin)含量紅外光譜法定量檢測(cè)試劑盒20
檸檬苦素；吳茱萸內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,吳茱萸提取) Limonin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品,吳茱萸提取 ELISAKitAng-Ⅰ人血管緊張素Ⅰ規(guī)格：48T/96T
檸檬苦素，黃柏內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,橙皮提取) Limonin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品,橙皮提取 小鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒 ，英文名： C4a ELISA Kit巴馬汀氯化物一水合物(分析標(biāo)準(zhǔn)品) Palmatine
chloride hydrate 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人β膠原交聯(lián)(bCTx)試劑盒 Human
beta-crosslaps,bCTx ELISA kit
BSA[=N,O-雙(基硅基)乙酰胺](>75.0%(GC)) N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide 質(zhì)量規(guī)格：>75.0%(GC) 人β-連環(huán)蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)試劑盒 Human CTNNB1 ELIS
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
C57/B6-S；小鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。