細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株；A12D3
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
A12D3；雜交瘤細(xì)胞株 |
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生長特性 |
懸浮生長 |
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貨號 |
BJ-01X86022 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
(2Z,6Z,10E,14E,18E)-Farnesylfarnesol 9
Solanesol 13190-97-1 中文名：茄尼醇 分子式：C45H74O 兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Methyl
(9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate
109837-85-6 中文名： 分子式：C19H34O3
Human plasmin aiplasmin complex (PAP) ELISA Kit 人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒
1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 138195-49-0 中文名： 分子式：C29H36O17
Humancarbonicanhydrase,CAELISAKit 人酶(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Mumeose K 213
胰島素樣生長因子Ⅱ（69-84） Insulin-Like Growth Factor II(69-84) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒 ，英文名： SP-C ELISA Kit
白介素-1β轉(zhuǎn)化酶底物 Interleukin-1β Convertase
Substrate 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA檢測試劑盒RatLactoferrin,LTF/LFELISAkit 96T/48T
下鈣素
Katacalcin 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 人白介素22(IL-22)試劑盒 Human Ierleukin 22,IL-22 ELISA KIT
肯普肽
Kemptide 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 英文名稱MouseansferrieceptorELISAKit小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)規(guī)格：96T/48T
運動升壓素
Kinetensin 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR PDGF-A蛋白共沉淀分析試劑盒5
層粘連蛋白（925-933） Laminin (925-933) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
Porcinesolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISA試劑盒豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
層粘連蛋白（929-933） Laminin (929-933) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒 ，英文名： SP-B ELISA Kit
層粘連蛋白九肽，酰胺
Laminin Nonapeptide, Amide 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 大鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA檢測試劑盒RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 96T/48T
白細(xì)胞焦激肽（4-8）；Pheromonotropic五肽 Leucopyrokinin
(4-8);Pheromonotropic Pentapeptide 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 人白介素-21(IL-21)試劑盒 Human IL-21 ELISA KitL-山梨糖(標(biāo)準(zhǔn)品)
L-(-)-Sorbose 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人5羥二十碳四烯酸(5-HETE)試劑盒 Human 5-hydroxyeicosateaenoic acid,5-HETE ELISA Kit
糖精鈉 水合物(標(biāo)準(zhǔn)品) Saccharin
salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA檢測試劑盒Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISAKit 96T/48T
標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.05000mol
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
A12D3；雜交瘤細(xì)胞株通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。