細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
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CANX；小鼠雜交瘤細(xì)胞 |
半貼壁生長 |
BJ-01X85487 |
細(xì)胞名稱 CANX；小鼠雜交瘤細(xì)胞
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該雜交瘤細(xì)胞由湖南遠(yuǎn)泰生物技術(shù)有限公司制備并提交，細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗，可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
癌細(xì)胞;SK-BR-31-(叔丁基二甲硅基)咪唑(>98.0%(T))1-(tert-Butyldimethylsilyl)imidazole質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / MAC-IP 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-代丁二(>98%,BR)N-Iodosuccinimide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
MJ(懸浮) 瘤N',N-二甲基甘氨酸鹽酸鹽(>98%,BR)N-N-Dimethylglycine 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
95-D高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 Human high metastatic lung cancer cell line 95-D
RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS正壬基-beta-D-麥牙糖苷(>98%,BC)n-Nonyl-beta-D-maltopyranoside質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC
SERPINA12 Protein
Human 重組 Vaspin / SerpinA12 蛋白 (His 標(biāo)簽)正辛基-beta-D-麥牙糖苷(>98% (HPLC),BC)n-Octyl-b-D-maltopyranoside質(zhì)量規(guī)格：>98% (HPLC),BC井岡霉素 Validamycin 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA檢測試劑盒Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISAKit
96T/48T
腐草霉素
Phleomycin 質(zhì)量規(guī)格：≥97%,進(jìn)分 大鼠細(xì)胞色素P4502E1(CYP2E1)試劑盒 Rat cytochrome P450 2E1,CYP2E1 ELISA Kit
寡霉素
Oligomycin, from Streptomyces 質(zhì)量規(guī)格：>92%,進(jìn)分 英文名稱RatSHBGELISAKit大鼠性結(jié)合球蛋白(SHBG)規(guī)格：96T/48T
紡錘菌素
Netropsin di 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,進(jìn)分 果類果膠化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20
頭孢菌素C鋅鹽 Cephalosporin C zinc salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 ELISAKitPF-3人血小板因子3規(guī)格：48T/96T
細(xì)胞松弛素B
Cytochalasin B 質(zhì)量規(guī)格：>96%,進(jìn)分 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP-1 ELISA Kit
煙曲霉素
Fumagillin from Aspergillus fumigatus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分 大鼠抗凝血酶受體(A)ELISA檢測試劑盒Ratai-thrombieceptor,AELISAKit 96T/48T
寡霉素B
Oligomycin B from Streptomyces 質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分 人層粘連蛋白-5(LN-5)試劑盒 Human
Laminin-5,LN-5 ELISA Kit
棒曲霉素
Patulin from Penicillium expansum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)口 Ratthrombospondin1,TSP-1ELISAKit大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
3-二苯甲酮 3-Bromobenzophenone 質(zhì)量規(guī)格：>97%,原裝進(jìn)口 LoTE分子生物級溶液500毫升人胃蛋白酶原C(PGC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:Pepsinogen II ,Gastricsin,PGII Human PGC(Pepsinogen C) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組PGC濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
CANX；小鼠雜交瘤細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。