細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
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PA317；小鼠胚胎成纖維細胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X85431 |
細胞名稱 PA317；小鼠胚胎成纖維細胞
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 PA317細胞株源自TK- NIH/3T3細胞，通過pBR322中的包裝結(jié)構(gòu)DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉(zhuǎn)染構(gòu)建而成。通過感染或轉(zhuǎn)染將逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導入這些細胞，**可以感染許多哺乳動物細胞的雙嗜性載體顆粒。這株細胞**的病毒顆粒已成功地用于將基因?qū)肴梭w。可能因為轉(zhuǎn)入DNA丟失，能夠包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的PA317細胞百分比隨傳代而減少。在含0.03 mM 次黃嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培養(yǎng)基中短暫(大約5天)選擇，可以選出保留了包裝功
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C17
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細胞STR鑒定服務流程：
HUVEC, 臍靜脈內(nèi)皮細胞DAPT (GSI-IX)DAPT (GSI-IX)質(zhì)量規(guī)格：>98%,γ-secretase抑制劑
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 MSU-1細胞 Ha Fe(羊膜細胞)XAV-939;NVP-XAV
939XAV939質(zhì)量規(guī)格：>98%
急性T細胞白血病細胞;TALL-104胡黃連苷I（標準品）Picroside I質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 細胞裂解液 (陽性對照) 胡黃連苷 II(標準品)Picroside II質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
低侵襲性脈絡膜色素素瘤細胞;OCM-1A胡黃連苷 III（標準品）Picroside III質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品rU亞磷酰胺單體 rU Phosphoramidite 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 英文名稱RatVitaminB6ELISAKit大鼠維生素B6(VB6)規(guī)格：96T/48T
Bz-rA亞磷酰胺單體 Bz-rA
Phosphoramidite 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 烘賠食品乙酸激酶法定量檢測試劑盒20
i-bu-rG亞磷酰胺單體 i-bu-rG
Phosphoramidite 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR ELISAKitHb-AGE人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格：48T/96T
PF299804（EGFR抑制劑）
Dacomitinib 質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細胞培養(yǎng) 小鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： MC Ab ELISA Kit
Ac-rC亞磷酰胺單體 Ac-rC
Phosphoramidite 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠黑色素細胞抗體(MCAb)ELISA檢測試劑盒Ratmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 96T/48T
素(含檸檬酸鹽緩沖液) Tetrodotoxin 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進分 人波形蛋白(VIM)試劑盒 Human vimein ELISA Kit
素粉
Tetrodotoxin 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進分 Rati-iodothyronine,T3ELISAKit大鼠狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
AC-DC亞磷酰胺單體 Ac-dC
Phosphoramidite 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR MHPG高效液相色譜電化學定量檢測試劑盒20
2,2'-脫水-5-甲基尿苷 2,2'-Anhydro-5-Me-U 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
PorcineEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA試劑盒豬(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
7-DEAZA-7--2'-脫氧鳥苷 7-Deaza-7-I-2’-dG 質(zhì)量規(guī)格：>97% 小鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA 試劑盒人生長分化因子15(GDF15)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:GDF-15, MIC-1, MIC1, NAG-1, PDF, PLAB, PTGFB, TGF-PL Human GDF15(Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組GDF15濃度
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
PA317；小鼠胚胎成纖維細胞采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。