細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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C3H/10T1/2, Clone 8；小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 |
貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X85361 |
細(xì)胞名稱 C3H/10T1/2, Clone 8；小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系是由C. Reznikoff等（1972）從C3H系小鼠胚胎細(xì)胞分離。此細(xì)胞對(duì)過(guò)度長(zhǎng)滿的細(xì)胞有絲分裂抑制非常敏感，在同源小鼠中不產(chǎn)生腫瘤，無(wú)自然轉(zhuǎn)化的背景，也不含明顯內(nèi)源性轉(zhuǎn)化鼠類白血病或肉瘤病毒。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 P(10+5)
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞總RNAHIBEpiC NA托瑞米芬(標(biāo)準(zhǔn)品)Toremifene 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
PAK3 Others
Human PAK3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 奧昔布寧N氧化物Oxybutynin N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-I(R)-N-去乙基奧昔布寧鹽酸鹽(R)-N-Desethyl Oxybutynin 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
SMC-1細(xì)胞，胸膜細(xì)胞瘤 早幼粒急性白血病細(xì)胞系,HL-60細(xì)胞 小鼠子細(xì)胞;U14α-去環(huán)己基-α-苯基奧昔布寧α-Descyclohexyl-α-phenyl Oxybutynin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFP(S)-N-去乙基鹽酸奧昔布寧(S)-N-Desethyl Oxybutynin 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口柯里拉京（標(biāo)準(zhǔn)品） Corilagin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAquaporin2,AQP-2ELISAKit
96T/48T
人參皂苷F3（標(biāo)準(zhǔn)品） Ginsenoside F3 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠絲氨酸蛋白酶抑制劑alpha-1 試劑盒 Rat
serine protease inhibitor alpha 1 ELISA kit
槐定堿（標(biāo)準(zhǔn)品）
Sophoridine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥96.50%，標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatT3ELISAKit大鼠狀腺原氨酸(T3)ELISAKit規(guī)格：96T/48T
去甲澤拉木醛（標(biāo)準(zhǔn)品）
Demethylzeylasteral 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 活化蛋白C(APC)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
鹽酸去氫駱駝蓬堿（標(biāo)準(zhǔn)品）
Harmine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitTS人胸苷酸合成酶規(guī)格：48T/96T
巖大戟內(nèi)酯B（標(biāo)準(zhǔn)品） Jolkinolide B 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 ，英文名： BMP-4 ELISA Kit
路路通內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）
Liquidambaric lactone 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血清(NO)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratniicoxide,NOELISAKit
96T/48T
甘油三油酸酯（標(biāo)準(zhǔn)品）
Glycerine trioleate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)試劑盒 Human cicaicial Pemphigoid,CP ELISA Kit
長(zhǎng)春花堿（標(biāo)準(zhǔn)品）
Vinblastine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Ratα-Glucosidase,a-GluELISAKit大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
長(zhǎng)春花堿 Vinblastine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR P1噬菌體培養(yǎng)試劑盒10人肝配蛋白A受體3(EPHA3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:EPHA3, Epha3, AW492086, Cek4, ETK1, End3, Hek, Hek4, Mek4, Tyro4, EK4, ETK, EPH receptor A3, HEK, HEK4, TYRO4 Human EPHA3(Ephrin Type A Receptor 3) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組EPHA3濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
C3H/10T1/2, Clone 8；小鼠胚胎成纖維細(xì)胞2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。