細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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C3110D2B2；雜交瘤（B類） |
半貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X85293 |
細(xì)胞名稱 C3110D2B2；雜交瘤（B類）
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體；凍存前做支原體去除
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細(xì)胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
HEPG
CL-0290MDA-MB-468(癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硫酸鋅七水(AR)Zinc sulfate, heptahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR
RLF, 大鼠成纖維細(xì)胞1酸鉀鈉四水Potassium
tatrate, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7 內(nèi)膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL縮二脲Biuret質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHA-sp NA硫酸鎂無(wú)水(分子生物學(xué)級(jí))Magnesium sulfate anhydrous質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)甘丙肽，大鼠
Galanin, rat 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 英文名稱RatendotoxinELISAKit大鼠內(nèi)(endotoxin)ELISAKit規(guī)格：96T/48T
甘丙肽(1-13)-神經(jīng)肽Y(25-36)酰胺(M32) Galanin (1-13)-Neuropeptide
Y(25-36), amide (M32) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 基質(zhì)膠體法大鼠胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒10
甘丙肽信號(hào)關(guān)聯(lián)肽（1-41）酰胺；Preprogalanin(65-105)酰胺 Galanin Message Associated Peptide
(1-41), amide; Preprogalanin(65-105), amide 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR ELISAKitCagA人細(xì)胞相關(guān)蛋白A規(guī)格：48T/96T
胃泌素Ⅰ（1-14），人 Gastrin I (1-14) (human) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠分化簇抗原30配體(CD30L)ELISA試劑盒 ，英文名： CD30L ELISA Kit
胃泌素釋放肽，人 Gastrin Releasing Peptide,human 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA檢測(cè)試劑盒ChickenHeatShockProtein60,HSP-60ELISAKit 96T/48T
胃泌素釋放肽，豬
Gastrin Releasing Peptide,procine 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 人3型1-0酸鞘氨醇受體(S1P3)試劑盒 Human
S1P3 ELISA Kit
胃泌素釋放肽-Lys（生物素），人 Gastrin Releasing Peptide-Lys(Biotin),
human 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 英文名稱MouseP-SelectinELISAkit小鼠P-Selectin規(guī)格：96T/48T
胃饑餓素，人
Ghrelin (human) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 冰凍切片組織IKB-ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
生長(zhǎng)釋放因子，大鼠
GHRF, rat 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
RatCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeⅠcollagen,ⅠCTPELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
生長(zhǎng)釋放因子（1-44），人 GHRF (1-44), human 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠肺部激活調(diào)節(jié)趨化因子(PARC)ELISA試劑盒 ，英文名： PARC ELISA Kit人瘦素受體(LEPR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:CD295, LEP-R, LR, LEPRD, OB-R, OBR Human LEPR(Leptin Receptor) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組LEPR濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
C3110D2B2；雜交瘤（B類）4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。