細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 PUMC-mips-C4；小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞
形態(tài)特性 克隆樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 裸鼠移植實驗證明可向三個胚層分化。
培養(yǎng)條件 KO-DMEM + 15% FBS + 103U/ml LIF + 2mM L-Glu + 1% NEAA + 0.1M β-Mer
傳代方法 1:10傳代；3~4天傳代一次
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
PUMC-mips-C4；小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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貨號 |
BJ-01X85285 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
胚肺二倍體細(xì)胞;HL橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品）Hesperidin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 橙皮苷Hesperidin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%,BR
間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓總RNAHMSC-bm
NA橙皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)Hesperitin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
PARP1 Others Mouse 小鼠 PARP-1 / PARP 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蟲草素(標(biāo)準(zhǔn)品)Cordycepin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
家貓肺細(xì)胞;FCA-L1川陳皮素;蜜橘黃素Nobiletin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BR物質(zhì)P（1-9） Substance P (1-9) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
PorcineTestoterone,TELISA試劑盒豬睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
物質(zhì)P（7-11） Substance P (7-11) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠防御素β2(DEFβ2)ELISA試劑盒 ，英文名： DEFβ2 ELISA Kit
TA-0910，他替瑞林 TA-0910,
taltirelin 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 人發(fā)動蛋白2(DNM2)ELISA檢測試劑盒Humandynamin2,DNM2ELISAKit 96T/48T
促甲狀腺釋放，游離酸
TRH, Free Acid 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 大鼠固酮(ALD)試劑盒 Rat aldosterone,ALD ELISA Kit
尿皮質(zhì)Ⅲ，小鼠
Urocortin III, mouse 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 英文名稱RatPhosphoinositide-3kinaseELISAKit大鼠0脂酰肌醇三羥基激酶(PI3K)規(guī)格：96T/48T
纈絡(luò)肽（VQY），豬 Valosin Peptide (VQY),porcine 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法(gelatin-zymography)電泳分析試劑盒(MMP2/9)5/10
血管活性腸肽
Vasoactive Intestinal peptide 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR ELISAKitHEV-IgG人戊型肝炎病毒IgG規(guī)格：48T/96T
Z-Ala-Ala-Leu-pNA Z-Ala-Ala-Leu-pNA 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠防御素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒 ，英文名： DEFβ1 ELISA Kit
三亞甲基碳酸酯
TMC 質(zhì)量規(guī)格：
度≥99% 人蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA檢測試劑盒HumanGliadinIgAELISAKit 96T/48T
碳酸錳(>98%,BR) Manganese (II) carbonate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒 Rat iact Parathormone,i-PTH ELISA Kit人生長停滯特異性蛋白6(Gas6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:GAS-6, AXLLG, AXSF Human Gas6(Growth Arrest Specific Protein 6) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組Gas6濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4PUMC-mips-C4；小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。