細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
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PUMC-mips-B1；小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X85279 |
細胞名稱 PUMC-mips-B1；小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞
形態(tài)特性 克隆樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 裸鼠移植實驗證明可向三個胚層分化。
培養(yǎng)條件 KO-DMEM + 15% FBS + 103U/ml LIF + 2mM L-Glu + 1% NEAA + 0.1M β-Mer
傳代方法 1:10傳代；3~4天傳代一次
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
細胞STR鑒定服務(wù)流程：
Hep 3B(肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27，，小鼠，綿羊，豬，大鼠PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
AGRP Others
Human AgRP 細胞裂解液 (陽性對照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27（6-27），，雞，小鼠，豬，大鼠PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse,
ovine,porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
角膜上皮細胞HCEpiC垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38（16-38），，雞，小鼠，綿羊，豬，大鼠PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse,
ovine,porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
SECTM1 Others
Human SECTM1 / K12 細胞裂解液 (陽性對照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽相關(guān)肽（1-29），大鼠PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
HMy2.CIR B 母細胞胰多肽，Pancreatic
Polypeptide,human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR苯氧乙酸鈉(>98%,BR) Phenoxyaceti acid salt 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR ELISAKitGRP人胃泌素釋放多肽規(guī)格：48T/96T
水楊酸苯酯(>98%,BR) Phenyl salicylate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠泛醌細胞色素C還原酶核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)ELISA試劑盒 ，英文名： UQCRC2 ELISA Kit
磷脂酶A2
Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom 質(zhì)量規(guī)格：比活性：>200U/mg，BC 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA檢測試劑盒Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit
96T/48T
對尼泊金丁酯鈉(>98%,USP) p-Hydroxybenzoic acid butyl ester salt 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP 大鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)試劑盒 Rat
Hydroxymethylglaryl CoA Reductase,HMG-CoAR ELISA kit
尼泊金乙酯鈉(>98.5%,BR) p-Hydroxybenzoic acid ethyl ester salt 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR 英文名稱RatpANCAELISAKit大鼠抗中性粒細胞胞漿抗體(甲固定)(pANCA)規(guī)格：96T/48T
尼泊金甲酯鈉(>99%,BR) p-Hydroxybenzoic acid methyl ester salt 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 寄生蟲總RNA分離試劑盒20
尼泊金丙酯鈉(>98.5%,USP) p-Hydroxybenzoic acid propyl ester salt 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP ELISAKitGasin人胃泌素規(guī)格：48T/96T
庚二酸(>98%,BR) Pimelic acid 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠翻譯調(diào)節(jié)腫瘤蛋白1(TPT1)ELISA試劑盒 ，英文名： TPT1 ELISA Kit
聚維酮
Poly(vinylpyrrolidone)–Iodine complex 質(zhì)量規(guī)格：BR 人強啡肽(Dyn)ELISA檢測試劑盒Humandynorphin,DynELISAKit
96T/48T
聚 Polypropylene glycol 2000 質(zhì)量規(guī)格：BR 大鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)試劑盒 Rat Hydroxymethylglaryl CoA,HMG-CoA ELISA kit人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:CNTF Human CNTF(Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組CNTF濃度
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
PUMC-mips-B1；小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。