細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 M5076；小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤
形態(tài)特性 梭形
生長(zhǎng)特性 半懸浮生長(zhǎng)，貼壁細(xì)胞呈短梭形。
特征特性 該細(xì)胞來源于C57BL/6小鼠卵巢組織自發(fā)的網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤，經(jīng)細(xì)胞形態(tài)和功能鑒定后為巨噬細(xì)胞來源：該細(xì)胞具有吞噬活性；表達(dá)Fc受體，與綿羊紅細(xì)胞形成玫瑰花環(huán)；對(duì)51Cr標(biāo)記的紅細(xì)胞具有抗體依賴的細(xì)胞毒反應(yīng)；對(duì)同源小鼠腫瘤細(xì)胞（B16-F1）有巨噬細(xì)胞樣的細(xì)胞毒作用，且不需要LPS的激活；沒有NK細(xì)胞的活性；具有同小鼠腹腔巨噬細(xì)胞相當(dāng)?shù)娜芫?、非特異性酯酶和磷酸酶的活性；超微結(jié)構(gòu)顯示該細(xì)胞內(nèi)有吞噬小泡，缺乏緊密連接，這些特點(diǎn)都符合巨噬細(xì)胞的形態(tài)特征。核型分析顯示該細(xì)胞為亞二倍體，因羅伯遜易位，>80%的染色體
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15% HS
傳代方法 1:2~1:3傳代，3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
M5076；小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤 |
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生長(zhǎng)特性 |
半懸浮生長(zhǎng)，貼壁細(xì)胞呈短梭形。 |
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貨號(hào) |
BJ-01X85243 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Hs 746T(胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2單1酸阿糖腺苷;阿糖腺苷單1酸ARA-AMP;Vidarabine monophosphate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
Gibco 17100017 Collagenase
Type I 1gα-萘黃酮α-Naphthoflavone質(zhì)量規(guī)格：>98%, 進(jìn)口
晶狀體上皮細(xì)胞裂解物HLEpiCL紫脲酸銨Murexide質(zhì)量規(guī)格：ACS
ALDH3A1 Others
Human ALDH3A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸羥胺Hydroxylammonium chloride質(zhì)量規(guī)格：AR
小鼠色素瘤細(xì)胞;B163,3'-二甲基聯(lián)萘胺3,3'-Dimethylnaphthidine質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分膽戊基碳酸酯
Cholesterol Amyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格： Humahymusactivatioegulatedchemokine,TARCELISAKit人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
膽正辛基碳酸酯
Cholesterol n-Octyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：
小鼠凋亡相關(guān)因子(Fas/Apo-1/CD95)ELISA試劑盒 ，英文名： Fas/Apo-1/CD95 ELISA Kit
膽己基碳酸酯
Cholesterol Hexyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：
雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒ChickenIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T
4-(4-乙氧苯氧羰基)苯基碳酸戊酯(>95.0%(HPLC)) Amyl 4-(4-Ethoxyphenoxycarbonyl)phenyl
Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC) 人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)試劑盒 Human type Ⅱ collagen
helical peptide,HELIX-ⅡELISA Kit
碳酸丁基4-羧苯酯(>98.0%(T)) Butyl 4-Carboxyphenyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 英文名稱Mouselymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKit小鼠LFA-3(CD58)規(guī)格：96T/48T
水楊酸-4-辛基苯酯(>95.0%(GC)) 4-Octylphenyl Salicylate 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 冰凍切片組織MAPK蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
氧化偶氮苯-4,4'-二羧酸二乙酯(>97.0%(GC)) Diethyl Azoxybenzene-4,4'-dicarboxylate 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)
Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA試劑盒大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4,4'-雙(己氧基)氧化偶氮苯(>96.0%(N)) 4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(N) 小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS)ELISA試劑盒 ，英文名： FAS ELISA Kit
4,4'-二戊氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N))
4,4'-Diamyloxyazoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(N) 雞促黃體(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒ChickenLeinizingHormone,LHELISAKit 96T/48T
4,4'-二丁氧基氧化偶氮苯 4,4'-Dibutoxyazoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格： 人Ⅱ型膠原交聯(lián)C端肽(CTX-Ⅱ)試劑盒 Human Cross Linked C-Telopeptide Of Type II Collagen,CTX-Ⅱ ELISA Kit人促腎上腺皮質(zhì)釋放(CRH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:CRF, Corticoliberin Human CRH(Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)人血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中天然及部分重組CRH濃度。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
M5076；小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。