操作步驟：

1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預(yù)冷

2：離心收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時(shí)間3min）

3：用配制好的凍存液重懸細(xì)胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記

4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過夜（24h）

5：凍存管從凍存盒取出，轉(zhuǎn)移至液氮長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱 WEHI-3 [WEHI3]；小鼠血細(xì)胞

形態(tài)特性  圓形

生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)；部分細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)

特征特性  該細(xì)胞表達(dá)補(bǔ)體C3受體（C3R），產(chǎn)生溶菌酶、粒細(xì)胞集落刺激活性（CSA）、IL-3。4 ng/ml LPS可以抑制WEHI-3的生長(zhǎng)，更高濃度可以阻斷其生長(zhǎng)；30~40 μg/ml右旋葡聚糖也可抑制其生長(zhǎng)；可以吞噬乳膠顆粒，但無毒性；可吞噬酵母聚糖和BCG，并阻斷該細(xì)胞的生長(zhǎng)；該細(xì)胞僅表現(xiàn)出微弱的抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒反應(yīng)。鼠痘病毒陰性。

培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS

傳代方法  細(xì)胞密度維持在2×105~ 2×106/ml，每2~3天換液1次。

傳代情況 C5

凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

處理辦法：

① 脫落的細(xì)胞進(jìn)行離心收集，并在離心管中消化。

② 仍然貼壁的細(xì)胞，按照常規(guī)方法加入胰酶或其他解離劑消化。

③ 再將消化好的脫落細(xì)胞和貼壁細(xì)胞混合，按比例接種到新的培養(yǎng)器皿中。

放入培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)，若4小時(shí)后仍然沒有伸展，延長(zhǎng)靜置時(shí)間。注意，過夜靜置時(shí)，需倒出部分培養(yǎng)基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松透氣，保持氣體交換（L15培養(yǎng)體系除外）。

操作步驟

1：從冰箱拿出無血清非程序凍存液，待用

2：離心收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時(shí)間3min）

3：棄上清，加入適量無血清非程序凍存液，重懸細(xì)胞

4：按照1~1.5mL/管的量分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記

5：將凍存管直接移入-80℃冰箱中，24h后轉(zhuǎn)移至液氮長(zhǎng)期保存

細(xì)胞凍存液操作示意圖：

Hepa 1-6(小鼠肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2 胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]地塞米,氟美（標(biāo)準(zhǔn)品）Dexamethasone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

卵巢畸胎瘤細(xì)胞;PA-1鹽酸地爾硫卓Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸地爾硫卓(標(biāo)準(zhǔn)品)Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0433RWPE-2(前列腺正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2地美司鈉Dimesna 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

SL-7細(xì)胞，胚肺細(xì)胞 前列腺上皮細(xì)胞,RWPE2細(xì)胞 上皮細(xì)胞;MCF-10A甲磺酸多拉司瓊Dolasetron mesylate 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR吡嗪(>98.0%(GC))  Pyrazine  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 英文名稱RatMyoglobinELISAKit大鼠肌紅蛋白(MYO)規(guī)格：96T/48T

2,3-吡嗪二羧酸(>98.0%(HPLC)(T))  2,3-Pyrazinedicarboxylic Acid  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 酵母菌SD-P/HIS/ADE培養(yǎng)基100毫升

茴香偶酰(>98.0%(GC))  p-Anisil  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) ELISAKitgp130人糖蛋白130規(guī)格：48T/96T

2,2-二甲氧基-2-乙酮(>98.0%(GC))  2,2-Dimethoxy-2-phenylacetophenone  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) RabbitAmylinELISA試劑盒兔胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,4-二乙基硫雜蒽-9-酮(>90.0%(GC))  2,4-Diethylthioxanthen-9-one  質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(GC) 小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒人胱天蛋白酶3(CASP3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:CPP32, CPP32B, SCA-1, Apoptain, Yama Human CASP3(Caspase 3) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組CASP3濃度

WEHI-3 [WEHI3]；小鼠血細(xì)胞細(xì)胞復(fù)蘇步驟：

1：水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?

2：準(zhǔn)備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用

3：將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物**柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中