細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱(chēng) |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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BaF3；小鼠原B細(xì)胞株 |
懸浮生長(zhǎng) |
BJ-01X85223 |
細(xì)胞名稱(chēng) BaF3；小鼠原B細(xì)胞株
形態(tài)特性 圓形
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 生物法檢測(cè)生長(zhǎng)因子活性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；IL-3
傳代方法 1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
細(xì)胞;1301地蒽酚（標(biāo)準(zhǔn)品）ANTHRALIN質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 對(duì)羥基（標(biāo)準(zhǔn)品）4-Hydroxyphenylacetamide質(zhì)量規(guī)格：供檢查用
CM-H009支氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL奮乃靜（標(biāo)準(zhǔn)品）Prochlorperazine質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
SW480細(xì)胞，結(jié)腸癌細(xì)胞 色素瘤細(xì)胞,MV3細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;Mao奮乃靜Prochlorperazine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
1,4-二苯氧基苯(>98.0%(GC)) 1,4-Diphenoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 酵母菌SD-G培養(yǎng)基100毫升
4,4'-二羧基二苯醚(>98.0%(GC)(T))
4,4'-Dicarboxydiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) ELISAKitCDT人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白規(guī)格：48T/96T
4,4'-二羥基二苯醚(>98.0%(GC))
4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 小鼠蛋白激酶D1(PRKD1)ELISA試劑盒 ，英文名： PRKD1 ELISA Kit
2,2'-二羥基二苯醚(>98.0%(GC))
2,2'-Dihydroxydiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanerythrocytemembraneprotein,EMPELISAKit 96T/48T
4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚(>98.0%(GC)) 4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒 Rat
Brain derived neuroophic facor,BDNF ELISA Kit
4-叔丁基二苯硫醚(>98.0%(GC))
4-tert-Butyldiphenyl Sulfide 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 英文名稱(chēng)RatMaixmetalloproteinase-3—MMP-3ELISAkit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISAkit規(guī)格：96T/48T
雙(4-羥苯基)硫醚(>98.0%(GC)) Bis(4-hydroxyphenyl) Sulfide 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 酵母菌SD-HIS培養(yǎng)基100毫升人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱(chēng):CMM9, DKCA2, DKCB4, EST2, PFBMFT1, TCS1, TP2, TRT Human TERT(Telomerase Reverse Transcriptase) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組TERT濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
BaF3；小鼠原B細(xì)胞株1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。