注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：
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產(chǎn)品名稱 |
禽流感/新城疫病毒(AIV/NDV)核酸試劑盒實驗步驟 |
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英文名稱 |
詳見說明 |
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貨號 |
BJ-R015083 |
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）
取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
禽流感/新城疫病毒(AIV/NDV)核酸試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
兔基質(zhì)金屬蛋白酶-12(rabbit MMP-12) 作用： ELISA 規(guī)格：
48T/96T 進口分裝
4-Oxododecanedioic acid 3
兔基質(zhì)金屬蛋白酶-1(rabbit MMP-1) 作用： ELISA 規(guī)格：
48T/96T 進口分裝
4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic acid 中文名： 分子式：C12H14N2O2 度：98.0%
兔基質(zhì)金屬蛋白酶 2 英文名稱： Rabbit Maix
Metalloproteinase 2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： MMP-2
5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid 中文名： 分子式：C5H3ClO2S
兔基質(zhì)金屬蛋白酶 1 英文名稱： Rabbit Maix
Metalloproteinase 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： MMP-1
5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid 中文名： 分子式：C5H3ClO2S 度：98.0%
兔基質(zhì)金屬蛋白9（MMP-9）ELISA試劑盒 4-O-(3-nitropropanoyl)corollin 122475-42-7 中文名： 分子式：C18H24N4O18 度：% 關鍵詞：
7-羥基-3-羧酸(>98.0%(HPLC)) 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
Rat macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 大鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒
7-二乙氨基-4-甲基(>98.0%(GC)(T)) 7-Diethylamino-4-methylcoumarin 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)
Humanmyelinassociatedglycoproteinaoaibody,MAGELISAKit 人抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
甲基鈣黃綠素藍水合物[用于配位滴定銅時的指示劑] Methyl Calcein Blue Hydrate 質(zhì)量規(guī)格：用于配位滴定銅時的指示劑 Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin1,AFP-L1ELISA試劑盒人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
6,7-亞甲二氧基-4-甲基-3-馬來(>98.0%(HPLC)(N))
6,7-Methylenedioxy-4-methyl-3-maleimidocoumarin 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N) 植物氨含量光譜法定量檢測試劑盒20
4-甲基-6,7-亞甲基二氧代(>99.0 %(GC)) 4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin 質(zhì)量規(guī)格： >99.0 %(GC) Mouse17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit小鼠17羥皮質(zhì)類(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
7-甲氧基-3-羧酸(>98.0%(GC)(T)) 7-Methoxycoumarin-3-carboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) 小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒 ，英文名： ENG/sCD105 ELISA Kit
溶劑綠 7(>85.0%(E)) Pyranin 質(zhì)量規(guī)格：>85.0%(E) 大鼠維生素D2(VD2)ELISA檢測試劑盒RatVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T
磺酰熒光素(>75.0%(HPLC)(T)) Sulfonfluorescein 質(zhì)量規(guī)格：>75.0%(HPLC)(T) 人蛋白酪氨酸0酸酶自身抗體試劑盒 Human Tyrosine Phosphatase Aoaibodies ELISA Kit
N-琥珀基-7-羥基-3-羧酸酯(>95.0%(HPLC)(T)) N-Succinimidyl
7-Hydroxycoumarin-3-carboxylate 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T) RatPeosidineELISAKit大鼠戊糖素(Peosidine)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
N-琥珀基-7-甲氧基-3-羧酸酯(>98.0%(HPLC)(N)) N-Succinimidyl 7-Methoxycoumarin-3-carboxylate 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N) GMS10甲基化基因電轉(zhuǎn)感受態(tài)5X100微升
Human thymus
leukemia aigen (TLa) ELISA Kit 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒 (R)-4-Benzyl-2-oxazolidinone 中文名：(R)-4-芐基-2-惡唑烷酮 分子式：C10H11NO2
Human thymus
independe aigen (TI-Ag) ELISA Kit 人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)ELISA試劑盒
(R)-(-)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone 中文名：(R)-(-)-4-芐基-3-丙?；?span lang="EN-US">-2-惡唑烷酮 分子式：C13H15NO3
Human thymus
expressed chemokine (TECK/CCL25) ELISA Kit 人胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)ELISA試劑盒
(R)-(+)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol 8
Human thymus
depende aigen (TD-Ag) ELISA Kit 人胸腺依賴性抗原(TD-Ag)ELISA試劑盒 (-)-Noe's Reagent 108031-79-4 中文名：(-)-核歐沃豪斯效應試劑 分子式：C24H38O3
Human thymus
activation regulated chemokine (TAFA/CCL17) ELISA Kit 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TAFA/CCL17)ELISA試劑盒 (2Z,6Z,10E,14E,18E)-Farnesylfarnesol 9