注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	魚源性成分(Fish)核酸試劑盒原理
英文名稱	詳見說(shuō)明
貨號(hào)	BJ-R015052

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

魚源性成分(Fish)核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

兔生成素2elisa試劑盒   兔生成素2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔生成素2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔生成素2試劑盒、兔生成素2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  5-Chloro-2-nitrobenzoic acid  2516-95-2  中文名：  分子式：C7H4ClNO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒     5-Benzyloxyindole  1215-59-4  中文名：5-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO  度：98.0%   

兔生成素2(ANG-2)ELISAKit     5α-Androstane-3β,17β-diol  571-20-0  中文名：5α-雄烷二醇  分子式：C19H32O2 

兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1elisa試劑盒   兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒、兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  5-Chloro-2-nitrobenzoic acid  2516-95-2  中文名：  分子式：C7H4ClNO4 

兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒     5-Benzyloxyindole  1215-59-4  中文名：5-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO

吲哚(standard for GC,>99.5%(GC))  Indole  質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,>99.5%(GC) Humanadrenalcoexaibody,ACAELISA試劑盒人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

辛酸乙酯(Standard for GC,>99%(GC))  Ethyl octanoate  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC) 植物DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MET)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20

異辛醇(standard for GC, ≥99.5% (GC))  2-Ethyl-1-hexanol  質(zhì)量規(guī)格：standard for GC, ≥99.5% (GC) mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit小鼠促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

棕櫚酸乙酯(standard for GC,≥99%(GC))  Ethyl palmitate  質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99%(GC) 小鼠類胰蛋白酶(TPS)ELISA試劑盒 ，英文名： TPS ELISA Kit

異辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))  2-Ethylhexanoic acid  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC) 人補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanComplemefragme3b,C3bELISAKit 96T/48T

茴香醛(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC))  p-Anisaldehyde  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC) 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子A(PDGF-A)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor A,PDGF-A ELISA kit

己二酸二異辛酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Bis(2-ethylhexyl)adipate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RattotalhemolyticcomplemeELISAKit大鼠總?cè)苎a(bǔ)體(CH50)規(guī)格：96T/48T

分散藍(lán) 35(標(biāo)準(zhǔn)品)  Disperse Blue 35  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 鈣鎂0酸平衡鹽(PBS)緩沖溶液500毫升

9-甲基蒽(標(biāo)準(zhǔn)品)  9-Methylanthracene  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitMUC5B人粘蛋白/粘液素5B規(guī)格：48T/96T

二甲四氯(標(biāo)準(zhǔn)品)  MCPA  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠類5α還原酶1(SRD5α1)ELISA試劑盒 ，英文名： SRD5α1 ELISA Kit

HumanEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISA試劑盒人腺來(lái)源的內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil  105889-80-3  中文名：  分子式：C28H37N5O10S2 

HumanelonginA,EloAELISA試劑盒人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (Z)-Butylidenephthalide  中文名：  分子式：C12H12O2 

Humanelecon-ansfer-flavoproteinbetapolypeptide,ETFBELISA試劑盒人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-(2-Amino-5-chlorophenyl)-1-(trifluoromethyl)-3-cyclopropyl-2-propyn-1-ol  209414-27-7  中文名：  分子式：C13H11ClF3NO 

HumanElastin,ELNELISA試劑盒人彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-(2-Chloroacetyl)pyrrolidine-2-carbonitrile  中文名：  分子式：C7H9ClN2O 

HumanElastaseELISA試劑盒人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,18-Octadecanediol  中文名：  分子式：C18H38O2