注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	糞腸球菌（EF）核酸試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
英文名稱	詳見說明
貨號(hào)	BJ-R014995

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

糞腸球菌（EF）核酸試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  11β-Hydroxy-2'-methyl-5'βH-pregna-1,4-dieno[17,16-d]oxazole-3,20-dione  13649-88-2  中文名：  分子式：C23H29NO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  11α-Hydroxycanrenone  中文名：  分子式：C22H28O4  度：98.0%

兔子皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  11α-Hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione  564-33-0  中文名：11α-羥基-雄甾-4-烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子皮質(zhì)醇elisa試劑盒   兔子皮質(zhì)醇試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子皮質(zhì)醇試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子皮質(zhì)醇試劑盒、兔子皮質(zhì)醇elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  9-Anthracenecarboxylic acid  中文名：9-蒽甲酸  分子式：C15H10O2  度：98.0%

兔子皮質(zhì)醇elisa試劑盒   兔子皮質(zhì)醇試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子皮質(zhì)醇試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子皮質(zhì)醇試劑盒、兔子皮質(zhì)醇elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  中文名：  分子式：C8H10N2O3S  度：98.0%

1-癸烷磺酸鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]  IPC-ALKS-10  質(zhì)量規(guī)格：離子對(duì)色譜用試劑 人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanglathioneS-ansferases,GSTpiELISAKit 96T/48T

1-十一烷基磺酸鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]  IPC-ALKS-11  質(zhì)量規(guī)格：離子對(duì)色譜用試劑 大鼠胰島素原(PI)試劑盒 Rat Proinsulin,PI ELISA Kit

1-十二烷基磺酸鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]  IPC-ALKS-12  質(zhì)量規(guī)格：離子對(duì)色譜用試劑 英文名稱HumanAGRPELISAKit人Agoi相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-十三烷磺酸鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]  IPC-ALKS-13  質(zhì)量規(guī)格：離子對(duì)色譜用試劑 糞便DNA分離+高質(zhì)化試劑盒50

十二烷基硫酸鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]  IPC-SDS  質(zhì)量規(guī)格：離子對(duì)色譜用試劑 ELISAKiAG-1人重組激活基因1規(guī)格：48T/96T

十五氟辛酸(約5mmol)[離子對(duì)色譜級(jí)]  IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol)  質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑 小鼠母系胚胎亮酸拉鏈蛋白激酶(MELK)ELISA試劑盒 ，英文名： MELK ELISA Kit

十五氟辛酸,高等級(jí)[離子對(duì)色譜級(jí)]  IPC-PFFA-8 HG  質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑 人花生四烯酸(AA)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanArachidonicAcid,AAELISAKit 96T/48T

9,10-二甲氧基蒽-2-磺酸鈉鹽[離子對(duì)色譜級(jí)]  IPA-DAS  質(zhì)量規(guī)格：用于氨類的熒光離子對(duì)試劑 大鼠胰島素樣因子3(INSL3)試劑盒 Rat Insulin-Like 3,INSL3 ELISA Kit

敵草隆(標(biāo)準(zhǔn)品)  Diuron  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5% 英文名稱Human8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT人8-異前列腺素F2α(8-ISOPGF2a)規(guī)格：96T/48T

茜素紅  Alizarin red  質(zhì)量規(guī)格：AR 糞便DNA分離試劑盒50

Wright's-GiemsaStainingSolion  3-Amino-3-phenyl-1-propanol  14593-04-5  中文名：3-氨基-3-苯基-1-丙醇  分子式：C9H13NO 

Umbelliferone   25g                 4-Aminobenzophenone  中文名：4-氨基二苯甲酮  分子式：C13H11NO 

Tween80   250ml  4-Aminobutyric acid  1956/12/2  中文名：4-氨基丁酸  分子式：C4H9NO2 

TMB   1g                 4-(Phenylthio)benzyl alcohol  中文名：  分子式：C13H12OS 

TMA   500g  4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene  1533-45-5  中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪  分子式：C28H18N2O2