注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	百日咳桿菌(BP)核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)
英文名稱	詳見(jiàn)說(shuō)明
貨號(hào)	BJ-R014986

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

百日咳桿菌(BP)核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit     9-Hydroxy-α-lapachone  22333-58-0  中文名：  分子式：C15H14O4  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  梓樹(shù); 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Actamido-3,5-dimethyladmantane  19982-07-1  中文名：  分子式：C14H23NO  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子雙氫睪elisa試劑盒   兔子雙氫睪試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子雙氫睪試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子雙氫睪試劑盒、兔子雙氫睪eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Acetylatractylodinol  中文名：乙酰蒼術(shù)素醇  分子式：C15H12O3 

兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒     9-Methoxy-α-lapachone  中文名：  分子式：C16H16O4  度：%

兔子瘦素(LEP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1'-Acetonaphthone  中文名：1'-萘乙酮  分子式：C12H10O  度：98.0%

乳糖酸(>98%,BC)  Lactobionic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC MousePeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISA試劑盒小鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-氨基酸氧化酶  L-Amino acid oxidase >4 U/mg  質(zhì)量規(guī)格：BC 小鼠腦素(BNP)ELISA試劑盒 ，英文名： BNP ELISA Kit

L-氨基酸氧化酶  L-Amino acid oxidase >4 U/mg  質(zhì)量規(guī)格：BC 人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanE3/ubiquitin-proteinligase,E3/UBPLELISAKit 96T/48T

乙酸鑭五水(>99%,BR)  Lanthanum (III) acetate, pentahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠胰多肽 試劑盒 Rat Pancreatic prohormone,PPY ELISA kit

L-刀豆氨酸硫酸鹽(>98%,BR)  L-Canavanine sulfate salt  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 英文名稱HumanAβ1-40proteinELISAKit人Aβ1-40蛋白規(guī)格：96T/48T

肉堿鹽酸鹽(>98%,BR)  L-Carnitine   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 分離溶酶體度雙酶法(COX/AP)檢測(cè)試劑盒20

肉堿鹽(>99%,BR)  L-Carnitine L-tartrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR ELISAKitMHCⅡ/HLA-Ⅱ人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類規(guī)格：48T/96T

化鉛(>98%,BR)  Lead (II) iodide  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠腦脊髓炎病毒(TMEV)ELISA試劑盒

硬脂酸鉛  Lead (II) stearate  質(zhì)量規(guī)格：BR Skin reactive factor / inflammatory factor (SRF/IF) ELISA Kit 人皮膚反應(yīng)因子/炎性因子(SRF/IF)ELISA試劑盒

硫酸鉛(>99%,BC)  Lead (II) sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BC Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

蠶多巴胺   英文名稱：   Bombyx Dopamine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   DPA  Methyl β-D-fructofuranoside  中文名：甲基-β-D-果糖苷  分子式：C7H14O6 

菜豆凝集素elisa試劑盒   菜豆凝集素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   菜豆凝集素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：菜豆凝集素試劑盒、菜豆凝集素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  4-Chlorodehydromethyltestosterone  2446-23-3  中文名：4-氯去氫甲基  分子式：C20H27ClO2 

補(bǔ)體C4測(cè)定試劑盒（比濁法）                    Rifampicin  13292-46-1  中文名：利福平  分子式：C43H58N4O12 

表皮生長(zhǎng)因子受體   英文名稱：   epidermal growth factor receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   EGFR  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  中文名：  分子式：C28H44O4  度：97.0%

表皮生長(zhǎng)因子受體   英文名稱：   epidermal growth factor receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   EGFR  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  中文名：  分子式：C28H44O4