注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
腦膜炎奈瑟菌通用型(NM-U)核酸試劑盒說明書 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號(hào) |
BJ-R014982 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
腦膜炎奈瑟菌通用型(NM-U)核酸試劑盒說明書組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒
Acetophenone tosylhydrazone
4545-21-5 中文名:苯乙酮對(duì)甲苯磺?;?span lang="EN-US"> 分子式:C15H16N2O2S
兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-Benzyl-5-ethoxyhydantoin 中文名:1-芐基-5-乙氧基海因 分子式:C12H14N2O3 度:98.0%
兔子細(xì)胞間粘附分子2elisa試劑盒 兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒、兔子細(xì)胞間粘附分子2eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Abscisic acid 14375-45-2 中文名:脫落酸 分子式:C15H20O4 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒 Abscisic
acid 中文名:脫落酸 分子式:C15H20O4 度:99.0%
兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit 9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene 117344-32-8 中文名:9,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴 分子式:C29H26O4
四氫甲基嘧啶羧酸(>98%,BR) Ectoine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratiduronatesulfatase,IDSELISAKit
96T/48T
氧化鎂碳酸鈉合劑
Eschka's mixture 質(zhì)量規(guī)格:BC 人兒茶酚抑素試劑盒 Human catestatin ELISA Kit
乙酯(>98%,BR) Ethyl dodeconoate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RatmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙基曙紅(>95%,BS) Ethyl eosin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BS DHPR受體蛋白共沉淀分析試劑盒5
沒食子酸乙酯
Ethyl gallate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
MouseParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA試劑盒小鼠甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
煙酸乙酯(>98%,BR) Ethyl nicotinate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠腦指蛋白(BFP)ELISA試劑盒 ,英文名: BFP ELISA Kit
二茂鐵
Ferrocene 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人多巴色素異構(gòu)酶(DT)ELISA檢測(cè)試劑盒Humandopachrometaomerase,DTELISAKit
96T/48T
反苯環(huán)丙胺鹽酸鹽;單胺氧化酶(MAO)抑制劑 Tranylcypromine (2-PCPA) HCl 質(zhì)量規(guī)格:>97%,單胺氧化酶(MAO)抑制劑 大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)試劑盒 Rat
glucagon-like peptide-1,GLP-1 ELISA Kit
黃胺酸(>96.5%,BS) Flavianic acid hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>96.5%,BS 英文名稱HumanBALPELISAKit人BALP規(guī)格:96T/48T
酸性品紅鈣(>60%,BS) Fuchsin acid calcium salt 質(zhì)量規(guī)格:>60%,BS 非吸煙者人體肺組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升
傳染性胃腸炎病毒(PTGV)核酸檢測(cè)試劑盒(-PCR法) 48T Sitostenone
1058-61-3 中文名:豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O 度:96.0% 關(guān)鍵詞: 蘇里南苦木; 火炬松; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
臭氧快速試劑盒
Ozone rapid reage kit
4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl 中文名: 分子式:C16H18FN3O3S 度:98.0%
橙
1g Prerubialatin 1667718-89-9 中文名: 分子式:C27H20O7 度:% 關(guān)鍵詞:
程序性死亡因子1 英文名稱: programmed
death 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
PD1 Periplocin 13137-64-9 中文名:杠柳毒苷 分子式:C36H56O13 度:98.5% 關(guān)鍵詞:
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23 英文名稱: Human Fibroblast Growth Factor 23 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FGF-23 4-Acetamidophenol 103-90-2 中文名:對(duì)乙酰氨基酚 分子式:C8H9NO2