注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 麻風(fēng)桿菌(ML)核酸試劑盒原理
英文名稱: 詳見說明
產(chǎn)品貨號: BJ-R014976
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: 熒光-PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
麻風(fēng)桿菌(ML)核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
兔子氧化低密度脂蛋白elisa試劑盒 兔子氧化低密度脂蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子氧化低密度脂蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子氧化低密度脂蛋白試劑盒、兔子氧化低密度脂蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Adefovir
dipivoxil 142340-99-6 中文名:阿德福韋酯 分子式:C20H32N5O8P 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 Adefovir dipivoxil 中文名:阿德福韋酯 分子式:C20H32N5O8P 度:98.0%
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISAKit Adefovir
106941-25-7 中文名:阿德福韋 分子式:C8H12N5O4P 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-Methyl-aminomethyl naphthalene
14489-75-9 中文名: 分子式:C12H13N 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子血小板因子4elisa試劑盒 兔子血小板因子4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子血小板因子4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板因子4試劑盒、兔子血小板因子4eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Adefovir dipivoxil 142340-99-6 中文名:阿德福韋酯 分子式:C20H32N5O8P
硬脂酸膽酯(>98%,BR) Cholesteryl stearate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA檢測試劑盒Mouseplateletfactor3,PF3ELISAKit
96T/48T
重膽堿(>98%,BR) Choline bitartrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人二羥基賴正己氨酸(DHLNL)試劑盒 Hurman
dihydroxylysinonorleucine,DHLNL ELISA kit
鉻粒(>99%,BR) Chromium granular 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
RatmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1ⅠELISAKit大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鉻粉(>99%,BR) Chromium powder 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
DH5α鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)10X200微升
氯化鉻六水(>98%,BR) Chromium(III) chloride, hexahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Mouseoxidizidedglathione,GSGSELISA試劑盒小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硫酸鉀鉻十二水
Chromium(III) potassium sulfate, dodecahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 ,英文名: eNOS ELISA Kit
硫酸鉻(>98%,BR) Chromium(III) sulfate, hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA檢測試劑盒MouseHeatShockFactor1,HSF1ELISAKit
96T/48T
酸性紅B
Chromotrope FB 質(zhì)量規(guī)格:>60%,BS 人二0酸腺苷(ADP)試劑盒 Human adenosine diphosphate,ADP ELISA kit
直接黃12
Chrysophenine 質(zhì)量規(guī)格:>70%,BS RatmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1ⅡELISAKit大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
肉桂酰胺(>98%,BR) Cinnamamide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR DH5α1毫升
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISAKit Hypocrellin A 中文名:竹紅菌甲素 分子式:C30H26O10
大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISAKit Tokinolide B 中文名: 分子式:C24H28O4
大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISAKit Tokinolide B 112966-16-2 中文名: 分子式:C24H28O4 度:96.0% 關(guān)鍵詞:
大鼠固(ALD)ELISAKit Tolazoline 中文名:鹽酸妥拉唑林 分子式:C10H13ClN2
大鼠二氧化酶elisa試劑盒 大鼠二氧化酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 大鼠二氧化酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠二氧化酶試劑盒、大鼠二氧化酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Lonidamine 中文名:氯尼達(dá)明 分子式:C15H10Cl2N2O2