注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研
參數規(guī)格:
產品名稱: 副溶血性弧菌(VP)核酸試劑盒實驗步驟
英文名稱: 詳見說明
產品貨號: BJ-R014967
產品規(guī)格: 50T
產品分類: 熒光-PCR法
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
副溶血性弧菌(VP)核酸試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane 中文名:2,2-雙(3-氨基-4-羥苯基)六氟丙烷 分子式:C15H12F6N2O2 度:98.0%
兔子組織多肽抗原elisa試劑盒 兔子組織多肽抗原試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子組織多肽抗原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子組織多肽抗原試劑盒、兔子組織多肽抗原eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
Aloe-emodin 中文名:蘆薈大黃素 分子式:C15H10O5 度:98.0%
兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 Allopurinol 中文名:別嘌醇 分子式:C5H4N4O
兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit Albendazole 54965-21-8 中文名:阿苯達唑 分子式:C12H15N3O2S 度:98.5% 關鍵詞:
兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit 9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 中文名: 分子式:C18H30O3
5-甲基吲哚(>98%,BR)
5-Methylindole 質量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitCathAb人組織蛋白酶抗體規(guī)格:48T/96T
5-硝基愈創(chuàng)木酚(植物級)
5-Nitroguaiacol 質量規(guī)格:>98%,植物級 小鼠尼克酰胺-N-甲基轉移酶(NNMT)ELISA試劑盒 ,英文名: NNMT ELISA Kit
6--2-萘酚(>98%,BR)
6-Bromo-2-naphthol 質量規(guī)格:>98%,BR 人β羥(β-OHB)ELISA檢測試劑盒HumanBeta-HydroxybyricAcid,β-OHBELISAKit 96T/48T
6-(γ,γ-二甲基烯丙基氨基)嘌呤核苷(植物級)
6-Dimethylallylamino purine riboside 質量規(guī)格:>98%,植物級 大鼠抑胃肽(GIP)試劑盒 Rat gasic inhibitory polypeptide,Gip ELISA
kit
6-甲基(>98%,BR)
6-Methylcoumarin 質量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱HumanCCL20ELISAKit人CCL20規(guī)格:96T/48T
7-氨基頭孢烷酸
7-Aminocephalosporanic acid 質量規(guī)格:>98%,BR 非同位素AP-BCIP/NBT法DNA南方雜交試劑盒5
8-羥基喹哪啶(>98%,BR)
8-Hydroxyquinaldine 質量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitcath-K人組織蛋白酶K規(guī)格:48T/96T
9,10-二蒽(>98%,BR)
9,10-Dibromoanthracene 質量規(guī)格:>98%,BR 小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒 ,英文名: ADRA1A ELISA Kit
雙酚芴(>98%,BR) 9,9-Bis(4-hydroxyphenyl) fluorine 質量規(guī)格:>98%,BR 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA檢測試劑盒MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISAkit
96T/48T
酸性藍29(>50%,Ind Grade) Acid blue 29 質量規(guī)格:>50%,Ind Grade 人肝細胞生長因子受體(c-MET/HGFR)試劑盒 Human HGFR ELISA Kit
凋亡相關因子配體 英文名稱:
apoptosis-inducing factor ligand 規(guī)格:
48T/96T 英文縮寫: Fas-L Venlaine
93413-69-5 中文名:文拉法辛 分子式:C17H27NO2 度:98.0% 關鍵詞:
凋亡相關因子配體 英文名稱:
apoptosis-inducing factor ligand 規(guī)格:
48T/96T 英文縮寫: Fas-L Venlaine
93413-69-5 中文名:文拉法辛 分子式:C17H27NO2
凋亡相關因子配體 英文名稱:
apoptosis-inducing factor Fas Ligand 規(guī)格:
48T/96T 英文縮寫: Fas
Ligand Cleroindicin B 中文名: 分子式:C8H14O3 度:96.0%
凋亡相關因子Fas/Apo-1 英文名稱:
apoptosis-inducing factor Fas/Apo-1 規(guī)格:
48T/96T 英文縮寫:
Fas/Apo-1 Venlaine 中文名:文拉法辛 分子式:C17H27NO2
凋亡相關因子 (Fas/Apo-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Varenicline tartrate 中文名:酒石酸伐侖克林 分子式:C17H19N3O6