注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 沙門氏菌SPP-spec核酸試劑盒原理

英文名稱:  詳見說明
產(chǎn)品貨號(hào)： BJ-R014960

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： 熒光-PCR法

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

沙門氏菌SPP-spec核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2-Acetylbutyrolactone  中文名：2-乙?；?nèi)酯  分子式：C6H8O3  度：98.0%

豚鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-10 ELISA Kit  2-Acetyl-6-methoxynaphthalene  3900-45-6  中文名：6-甲氧基-2-乙酰萘  分子式：C13H12O2  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

豚鼠白介素10(IL10)ELISA試劑盒 ，英文名： IL10 ELISA Kit  2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione  中文名：2-乙?；?span lang="EN-US">-1H-異吲哚-1,3(2H)-二酮  分子式：C10H7NO3  度：93.0%

豚鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1 ELISA Kit  2-Acetonaphthone  1993/8/3  中文名：2'-萘乙酮  分子式：C12H10O  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豚鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ，英文名： ALB ELISA Kit  2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose  中文名：N-乙酰氨基葡萄糖  分子式：C8H15NO6  度：99.0%

硬脂酸鈉(>95%,BR)   stearate  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR MouseOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫代硫酸鈉無(wú)水(>98.5%,BC)   thiosulfate anhydrous  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BC 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)ELISA試劑盒 ，英文名： uPAR ELISA Kit

Sulfo NHS LC Biotin  Sulfo NHS LC Biotin  質(zhì)量規(guī)格：BR 人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanai-EJ-aibody，EJ/GlyRSELISAKit 96T/48T

Sulfo NHS SS Biotin  Sulfo NHS SS Biotin  質(zhì)量規(guī)格：BR 大鼠游離β絨毛膜促性腺(f-βCG)試劑盒 Rat free chorionic gonadoopin,f-βCG ELISA KIT

四乙酰核糖(>98% (HPLC),BC)  Tetraacetylribose  質(zhì)量規(guī)格：>98% (HPLC),BC 英文名稱HumanCCL7ELISAKit人CCL7規(guī)格：96T/48T

酪氨酸脫羧酶  Tyrosine decarboxylase  質(zhì)量規(guī)格：>0.1 U/mg,BC 二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)體(Divalemetalanspoer1;DMTl)功能熒光檢測(cè)試劑盒20

維多利亞藍(lán) R  Victoria blue R  質(zhì)量規(guī)格：染料含量：>80%,BS ELISAKitTF人組織因子規(guī)格：48T/96T

α-酮戊二酸單鉀鹽(>98%，BR)  α-Ketoglutaric acid potassium salt  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒 ，英文名： uPA ELISA Kit

1-環(huán)己基二乙酸單酰胺(>98%，BR)  1,1-Cyclohexanediacetic acid monoamide  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR 人羥脯氨酸(Hyp)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanhydroxyproline,HypELISAKit 96T/48T

1,2-乙二硫醇(>98.5%，BR)  1,2-Ethanedithiol  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%，BR 大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)試劑盒 Rat helicobacter pylori (Hp) aibody (IgG) ELISA Kit

甘油三酯（TG）含量測(cè)定試劑盒   可見分光光度法    50管/48樣              Atractylodin  中文名：蒼術(shù)素  分子式：C13H10O 

甘油0酸   10g  Androstenediol-3-acetate  中文名：雄甾烯二醇-3-乙酸酯  分子式：C21H32O3  度：98.0%

甘露聚糖結(jié)合凝集素絲酸肽酶-2   英文名稱：   mannan-binding lectin associated serine proteases   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MASP-2  3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan  中文名：  分子式：C17H16ClIO2 

富組酸糖蛋白   英文名稱：   rich in histidine glycoprotein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HPRG  Norethindrone  68-22-4  中文名：炔諾酮  分子式：C20H26O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/24樣  Pregn-5-ene-3β,17α,20S-triol  中文名：  分子式：C21H34O3