注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 銅綠假單孢菌(PA)/綠膿桿菌 核酸試劑盒說明書
英文名稱: 詳見說明
產(chǎn)品貨號: BJ-R014954
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: 熒光-PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
銅綠假單孢菌(PA)/綠膿桿菌 核酸試劑盒說明書組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
豚鼠白三烯D4elisa試劑盒 豚鼠白三烯D4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠白三烯D4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠白三烯D4試劑盒、豚鼠白三烯D4eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
3-Chloro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone 中文名: 分子式:C17H25ClO
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒 Altrenogest 中文名:烯丙孕素 分子式:C21H26O2
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISAKit Alogliptin benzoate 850649-62-6 中文名:阿格列汀苯甲酸鹽 分子式:C25H27N5O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
豚鼠白三烯B4elisa試劑盒 豚鼠白三烯B4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠白三烯B4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠白三烯B4試劑盒、豚鼠白三烯B4eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Alogliptin 850649-61-5 中文名:阿格列汀 分子式:C18H21N5O2
豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISAKit alpha-Terthienylmethanol 13059-93-3 中文名: 分子式:C13H10OS3
無蛋白酶牛血清白蛋白
Albumin, from bovine Protease free 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級 MouseOncostatin-M,OSMELISA試劑盒小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硬脂酸鋁
Aluminum stearate 質(zhì)量規(guī)格:AR 小鼠凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)ELISA試劑盒 ,英文名: LOX1 ELISA Kit
鉍試劑III(>99%,BR) Bismuth(III) nitrate pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人血管活性腸肽(VIP)ELISA檢測試劑盒HumanVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISAKit
96T/48T
氫鈣二水(>98%,BR) Calcium phosphate, dibasic, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)試劑盒 Rat Free
i-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit
碳酸鈰
Cerium(III) carbonate, hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99.9%,AR 英文名稱HumanSolubleCD30ligandELISAKit人CD30配體(sCD30L)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
胰凝乳蛋白酶原 A
Chymotrypsinogen A 質(zhì)量規(guī)格:酶活:>1500 U/mg,BC 二(DABA)DNA比色定量測定試劑盒20
汽巴藍(lán)
Cibacron blue 3G-A 質(zhì)量規(guī)格:ACS Grade ELISAKitacetone山羊同檢測規(guī)格:48T/96T
DEAE葡聚糖 DEAE
Dextran 質(zhì)量規(guī)格:BR 小鼠凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)ELISA試劑盒 ,英文名: LOX-1 ELISA Kit
氟啶酮(>98%,植物級) Fluridone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物級 雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA檢測試劑盒ChickenLaminin,LNELISAKit
96T/48T
組胺(>98%,BC) Histamine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 人5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗體(IgA)試劑盒 Human 5HT IgA ELISA Kit
谷胱甘肽過氧化物酶elisa試劑盒 谷胱甘肽過氧化物酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 谷胱甘肽過氧化物酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:谷胱甘肽過氧化物酶試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
6-Aminopenicillanic acid 中文名:6-氨基青霉烷酸 分子式:C8H12N2O3S 度:98.0%
谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)測定試劑盒(比色法) Ranolazine di 中文名:鹽酸雷諾嗪 分子式:C24H35Cl2N3O4
谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)測定試劑盒(比色法) Repaglinide 13
谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)試劑盒 GR法 50管/48樣 Rengyol 93675-85-5 中文名:連翹環(huán)己醇 分子式:C8H16O3 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 連翹; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)試劑盒 DTNB法 50管/48樣 Rengyol 中文名:連翹環(huán)己醇 分子式:C8H16O3