注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	錦鯉皰疹病毒(KHV)核酸試劑盒實驗步驟
英文名稱	詳見說明
貨號	BJ-R014939

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

錦鯉皰疹病毒(KHV)核酸試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

豚鼠組胺(HIS)ELISAKit     Altrenogest  850-52-2  中文名：烯丙孕素  分子式：C21H26O2 

豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒   豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒、豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Amorolfine   78613-38-4  中文名：鹽酸阿莫洛芬  分子式：C21H36ClNO 

豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒     Amorolfine  67467-83-8  中文名：阿莫羅芬  分子式：C21H36ClNO 

豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit     alpha-Terthienylmethanol  中文名：  分子式：C13H10OS3  度：%

豚鼠主要組織相容性復(fù)合體elisa試劑盒   豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒、豚鼠主要組織相容性復(fù)合體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     Lenalidomide  191732-72-6  中文名：來那度胺  分子式：C13H13N3O3

血紅素(>95%,BR)  Hematin  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR RatleukoieneE4,LT-E4ELISAKit大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

聚乙二醇800  PEG 800  質(zhì)量規(guī)格：BR CREB蛋白共沉淀分析試劑盒5

炔雌醚;炔雌醇環(huán)戊醚  Quinestrol  質(zhì)量規(guī)格：USP Mouseneurofilameprotein,NFELISA試劑盒小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC)  Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom  質(zhì)量規(guī)格：比活度：>20 U/mg，BC 小鼠凝血因子Ⅹ(F10)ELISA試劑盒 ，英文名： F10 ELISA Kit

化丙啶(>95% (HPLC),BC)  Propidium iodide  質(zhì)量規(guī)格：>95% (HPLC),BC 人誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA檢測試劑盒Humaninducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKIT 96T/48T

十二烷基苯磺酸鈉(>95%,Tech Grade)   dodecylbenzenesulfonate  質(zhì)量規(guī)格：>95%,Tech Grade 大鼠載脂蛋白A1前體(Pre-Apo-A1)試劑盒 Rat apolipoprotein A1 precursor,Pre-Apo-A1 ELISA kit

硅酸鈉九水(>98%，BR)   silicate hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR 英文名稱HumanC-PeptideELISAKit人C-肽(C-Peptide)規(guī)格：96T/48T

5--3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR)  Bluo-Gal  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 端粒酶活性AP實時定量檢測試劑盒20

氫二鈉二水  Di hydrogen phosphate dihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR ELISAKit6-keto-PGF1a兔6同前列腺素F1a規(guī)格：48T/96T

中性蛋白酶  Neutral Protease from Bacillus polymyxa  質(zhì)量規(guī)格：酶活：20萬u/g 小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅨ ELISA Kit

甲型流感H3N2HA1   英文名稱：   Influenza A H3N2 HA1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   H3N2 HA1  Przewaquinone A  中文名：紫丹參甲素  分子式：C19H18O4 

甲型流感H1N1   英文名稱：   Influenza A H1N1(Swine Flu 2009) HA   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   H1N1 HA  Prosapogenin A  19057-67-1  中文名：薯蕷次皂苷A  分子式：C39H62O12 

甲型肝炎病毒抗體IgG   英文名稱：   Human Hepatitis A Virus IgG   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HAV IgG  n-Tritriacontan-16,18-dione  24514-86-1  中文名：  分子式：C33H64O2  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

甲型副傷寒沙門氏菌(SPA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T                 Topiramate  97240-79-4  中文名：托吡酯  分子式：C12H21NO8S 

家蠶卵黃蛋白elisa試劑盒   家蠶卵黃蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   家蠶卵黃蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：家蠶卵黃蛋白試劑盒、家蠶卵黃蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid  中文名：  分子式：C13H16O5