注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	無(wú)乳鏈球菌(StA)核酸試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
英文名稱	詳見(jiàn)說(shuō)明
貨號(hào)	BJ-R014935

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

無(wú)乳鏈球菌(StA)核酸試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

微量樣品DNA提取試劑盒   50T  Androst-2-en-17-one  中文名：5α-雄甾-2-烯-17-酮  分子式：C19H28O  度：98.0%

微量二（MDA）測(cè)定試劑盒（TBA法）  Polyhydroxybutyrate  26744-04-7  中文名：聚羥基丁酸酯  分子式：C12H20O7  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

微量二（MDA）測(cè)定試劑盒（TBA法）  Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate  2099-26-5  中文名：雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯  分子式：C23H34O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

微量DNA凝膠回收試劑盒   50T  Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate  1449-61-2  中文名：7-酮基去氫表雄酮醋酸酯  分子式：C21H28O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

微晶纖維素   50g  Androst-2-en-17-one  963-75-7  中文名：5α-雄甾-2-烯-17-酮  分子式：C19H28O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

二氫鈉一水(ACS級(jí))   phosphate, monobasic, monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：ACS級(jí),>98.5% MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA試劑盒小鼠N-乙?；?span lang="EN-US">-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

葡萄糖酸鈣  Calcium gluconate, hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99% 小鼠凝血因子VIIIa輕鏈(F8aLC)ELISA試劑盒 ，英文名： F8aLC ELISA Kit

十二烷基-β-D-麥芽糖苷;月桂?；溠刻擒?span lang="EN-US">  N-Dodecyl-b-maltoside  質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí) 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit 96T/48T

鹽酸氨基脲  Aminourea   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人肺耐藥蛋白(LRP)試劑盒 Human LRP ELISA Kit

硫酸鏈霉素溶液，30 mg/ml  Streptomycin sulfate solution, 30 mg/ml  質(zhì)量規(guī)格：Sterile溶液,30mg/ml Ratleukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乙酰胺  Acetamide  質(zhì)量規(guī)格：>98% Cr.NeoformansRFLP基因分析試劑盒20

萘乙酰胺(AR)  1-Naphthylacetamide  質(zhì)量規(guī)格：AR,>98% MouseNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鐵屑(>98%，BC)  Iron granules  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BC 小鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅫ ELISA Kit

檸檬酸鐵(>98%，BR)  Iron(III)   質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR 小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinElisakit 96T/48T

DL-乳酸(85~90%，BR)  DL-Lactic acid  質(zhì)量規(guī)格：85~90%，BR 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)試劑盒 Human SP-C ELISA Kit

抗** (AVP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Oxiracetam  62613-82-5  中文名：奧拉西坦  分子式：C6H10N2O3 

抗蛋白酶   250mg  Valnemulin   133868-46-9  中文名：鹽酸沃尼妙林  分子式：C31H53ClN2O5S  度：98.0%   

抗Livin 抗體   英文名稱：   Ailivin aibody   英文縮寫(xiě)：   ALA   規(guī)格：   48T/96T  Valsartan  137862-53-4  中文名：纈沙坦  分子式：C24H29N5O3 

荊豆凝集素elisa試劑盒   荊豆凝集素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   荊豆凝集素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：荊豆凝集素試劑盒、荊豆凝集素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     6-Aminoindole  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2 

金黃色葡萄球菌(SA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span lang="EN-US">)   48T  Topiramate  97240-79-4  中文名：托吡酯  分子式：C12H21NO8S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：