注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
西尼羅河病毒(WNV)核酸試劑盒原理 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014920 |
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
西尼羅河病毒(WNV)核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
蝦特定基因序列(FC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Aspergillon A
2239299-08-0 中文名: 分子式:C22H32O 度:98.0% 關鍵詞:
蝦特定基因序列(FC)核酸檢測試劑盒 48T
Aspergillon A 2239299-08-0 中文名: 分子式:C22H32O
蝦胺/酚 英文名稱: Octopamine 規(guī)格:
48T/96T 英文縮寫: OPM Aspartame
22839-47-0 中文名:阿司帕坦 分子式:C14H18N2O5 度:98.0% 關鍵詞:
細小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Artesunate
88495-63-0 中文名:青蒿琥酯 分子式:C19H28O8 度:98.0% 關鍵詞:
細小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒 48T Artesunate 88495-63-0 中文名:青蒿琥酯 分子式:C19H28O8
氫二鈉七水
phosphate, dibasic, heptahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
dATP溶液(100 mM) dATP 100 mM solution 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 小鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA 試劑盒
癸酸鈉
decanoate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,進分 Rat somal cell derived factor 1 beta (SDF-1
beta /CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒
瓊脂糖(美侖電泳級) Agarose 質(zhì)量規(guī)格:美侖,電泳級 Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
瓊脂糖(Sigma)
Agarose 質(zhì)量規(guī)格:Sigma原裝 Human1,25-dihydroxyvitaminD3,DVD/DHVD3ELISA試劑盒人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物血凝素
Phytohemagglutinin 質(zhì)量規(guī)格:BR /酵母細胞線粒體DNA萃取試劑盒10/20
6-糠基氨基嘌呤,激動素
Kinetin,6-Furfurylaminopurine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR MouseB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit小鼠B細胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸 EGTA, egtazic
acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學級 小鼠蘋果酸脫氫酶(MDH)ELISA試劑盒 ,英文名: MDH ELISA Kit
無水二氫鈉(分子生物學級) phosphate, monobasic, anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,分子生物學級 小鼠白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒MouseIerleukin1,IL-1ELISAKit
96T/48T
月桂?;“彼徕c(分子生物學級) lauroyl sarcosine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,分子生物學級 人分泌粒蛋白1(嗜鉻粒蛋白B)(CHGB/SCG1)試劑盒 Human CHGB/SCG1 ELISA kit
腦膜炎奈瑟菌通用型(NM-U)核酸檢測試劑盒 48T 3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol 中文名:3-乙酰基-5α-雄烷二醇 分子式:C21H34O3
納米二氧化鈦 Ribavirin 3
莫氏立克次體(RM)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T 3-Amino-3-phenylpropionic
acid 中文名:C9H11NO2 分子式:C9H11NO2
膜聯(lián)蛋白5 英文名稱: Annexin
5 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
ANXA-5 3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one 中文名: 分子式:C29H48O2
膜聯(lián)蛋白2 英文名稱: Annexin 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ANXA-2 Otophylloside B 中文名:青陽參苷B 分子式:C49H78O16