注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 口蹄疫病毒亞洲型(FMDV-Asia)核酸試劑盒實驗步驟

英文名稱:  詳見說明
產(chǎn)品貨號： BJ-R014883

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： 熒光-PCR法

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

口蹄疫病毒亞洲型(FMDV-Asia)核酸試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。

小鼠GATA結(jié)合蛋白elisa試劑盒   小鼠GATA結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠GATA結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠GATA結(jié)合蛋白試劑盒、小鼠GATA結(jié)合蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Benzyl 2,4-dihydroxyphenyl ketone  3669-41-8  中文名：2,4-二羥基苯基芐酮  分子式：C14H12O3  度：98.0%   

小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISAKit     Benzoyl-L-histidine  5354-94-9  中文名：苯甲?；?span lang="EN-US">-L-組氨酸  分子式：C13H13N3O3  度：98.0%   

小鼠Fractalkine（mouse Fractalkine）   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Menthyl-5-(4-amino-2-oxo-2H-pyrimidin-1-yl)-[1,3]oxathiolane-2-carboxylic acid  中文名：  分子式：C18H27N3O4S 

小鼠FMS樣酪酸激酶elisa試劑盒   小鼠FMS樣酪酸激酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠FMS樣酪酸激酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠FMS樣酪酸激酶試劑盒、小鼠FMS樣酪酸激酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Benzoyleneurea  86-96-4  中文名：亞苯甲酰基脲  分子式：C8H6N2O2  度：98.0%   

小鼠FMS樣酪酸激酶3配體elisa試劑盒   小鼠FMS樣酪酸激酶3配體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠FMS樣酪酸激酶3配體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠FMS樣酪酸激酶3配體試劑盒、小鼠FMS樣酪酸激酶3配體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Benzoyleneurea  86-96-4  中文名：亞苯甲?；?span lang="EN-US">  分子式：C8H6N2O2

鹽酸甲哌卡因  Mepivacaine HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 豬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA檢測試劑盒Porcineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 96T/48T

安普那韋   Amprenavir  質(zhì)量規(guī)格：>97% 大鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體受體1(AIL-R1)試劑盒 Rat AIL-R1 ELISA Kit

魯比替康; 9-硝基喜樹堿  Rubitecan  質(zhì)量規(guī)格：>99% 英文名稱HumanMGβ2ELISAKit人β2微球蛋白(MGβ2)規(guī)格：96T/48T

泊洛沙姆407  Polyethylene-polypropylene glycol  質(zhì)量規(guī)格：M.W12000，進口BASF分包 動物組織V型ATP酶(VtypeATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20

長春質(zhì)堿  Catharanthine hemitartrate  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISA試劑盒大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸長春質(zhì)堿  Catharanthine sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠趨化因子C-X3-C-基元受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒 ，英文名： CX3CR1 ELISA Kit

硫酸長春質(zhì)堿(標準品)  Catharanthine sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品 豬組胺(HIS)ELISA檢測試劑盒PorcineHistamine,HISELISAKit 96T/48T

康普瑞汀  Combretastatin A4   質(zhì)量規(guī)格：>99%,細胞培養(yǎng)級 大鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(AIL)試劑盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,AIL ELISA Kit

土霉素  Oxytetracycline  質(zhì)量規(guī)格：≥95%,BR 英文名稱Humanβ2-GP1Ig(A,G,M)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體Ig(A,G,M)(β2-GP1)規(guī)格：96T/48T

土霉素(進分)  Oxytetracycline  質(zhì)量規(guī)格：930u/mg,進分 動物組織β-半乳糖苷酶報告基因活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑20

人粘膜相關(guān)上皮趨化因子elisa試劑盒   人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒、人粘膜相關(guān)上皮趨化因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide  中文名：  分子式：C11H10ClN3OS  度：98.0%

人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒              2-Aminophenyl phenyl sulfide  中文名：2-氨基二苯硫醚  分子式：C12H11NS 

人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISAKit     2-Aminofluorene  153-78-6  中文名：2-氨基芴  分子式：C13H11N  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

人早老素2elisa試劑盒   人早老素2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人早老素2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人早老素2試劑盒、人早老素2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide  中文名：  分子式：C11H10ClN3OS 

人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISAKit     3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  中文名：  分子式：C19H15BrFN  度：98.0%