注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 豬鏈球菌型(SS-)核酸試劑盒說明書
英文名稱: 詳見說明
產(chǎn)品貨號: BJ-R014870
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: 熒光-PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
豬鏈球菌型(SS-)核酸試劑盒說明書組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISAKit Bindone 中文名:雙茚二酮 分子式:C18H10O3 度:98.0%
小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISAKit
Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane 105391-33-1 中文名:雙(3-乙基-5-甲基-4-馬來基苯基)甲烷 分子式:C27H26N2O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠α2抗纖溶酶elisa試劑盒 小鼠α2抗纖溶酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠α2抗纖溶酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠α2抗纖溶酶試劑盒、小鼠α2抗纖溶酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Bindone 1707-95-5 中文名:雙茚二酮 分子式:C18H10O3 度:98.0%
小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒
Bi-linderone 122
小鼠α1微球蛋白elisa試劑盒 小鼠α1微球蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠α1微球蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠α1微球蛋白試劑盒、小鼠α1微球蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Enrofloxacin 93106-60-6 中文名:恩諾沙星 分子式:C19H22FN3O3 度:98.0%
天青I;天青B Azure I 質(zhì)量規(guī)格:BS
Ratiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1ELISAKit大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
天青II
Azure II 質(zhì)量規(guī)格:BS CACNA1G基因甲基化程度定量分析試劑盒20
天青A
Azure A chloride 質(zhì)量規(guī)格:BS MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISA試劑盒小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三氯生
Triclosan 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP
gp96)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP gp96 ELISA Kit
刃天青/樹脂天青/刃天青鈉 Resazurin 質(zhì)量規(guī)格:BR,美國biofer進(jìn)分 小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA檢測試劑盒MousePlateletFactor4,PF-4ELISAKit 96T/48T
天青石藍(lán)
Celestine blue 質(zhì)量規(guī)格:BS 人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(C-1)試劑盒 Human
C-1 ELISA Kit
天青 B 曙紅 Azure B eosinate 質(zhì)量規(guī)格:sigma分裝 Ratiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
利馬前列素
Limaprost 質(zhì)量規(guī)格:>99% Carnoy固著液50毫升
天青II曙紅 Azure II eosinate 質(zhì)量規(guī)格:BS
MouseLeukoieneB4,LT-B4ELISA試劑盒小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
菲律賓菌素;非律平;Filipin Filipin complex from Streptomyces filipinensis 質(zhì)量規(guī)格:sigma分裝 小鼠熱休克蛋白β8(HSPβ8)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPβ8 ELISA Kit
人周期素依賴性激酶1elisa試劑盒 人周期素依賴性激酶1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人周期素依賴性激酶1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人周期素依賴性激酶1試劑盒、人周期素依賴性激酶1 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
2-Hydroxyquinoxaline 中文名: 分子式:C8H6N2O
人周期素依賴性激酶1(CDK1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CDK1 (Cyclin Depende Kinase 1) ELISA
Kit 2-Hydroxy-3-methylanthraquinone 17241-40-6 中文名: 分子式:C15H10O3 度:% 關(guān)鍵詞: 白花蛇舌草; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISAKit 2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic
acid 中文名: 分子式:C19H28INO3 度:98.0%
人重組激活基因2elisa試劑盒 人重組激活基因2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人重組激活基因2試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人重組激活基因2試劑盒、人重組激活基因2
elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
2-Flurbiprofen 51543-40-9 中文名:氟比洛芬 分子式:C15H13FO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒 2-Hydroxy-3-methylanthraquinone 中文名: 分子式:C15H10O3