注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	豬肺炎支原體(MHP)核酸試劑盒說明書
英文名稱	詳見說明
貨號(hào)	BJ-R014862

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

豬肺炎支原體(MHP)核酸試劑盒說明書組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

小鼠β甘露糖苷酶elisa試劑盒   小鼠β甘露糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠β甘露糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β甘露糖苷酶試劑盒、小鼠β甘露糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Ketoprofen  22071-15-4  中文名：酮基布洛芬  分子式：C16H14O3 

小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒     Bisoprolol fumarate  中文名：富馬酸比索洛爾  分子式：C22H35NO8  度：98.0%

小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISAKit     Bis(4-hydroxy-3,5-dimethylphenyl) sulfone  中文名：雙(4-羥基-3,5-二甲苯基)砜  分子式：C16H18O4S  度：98.0%

小鼠β酚(β-Nph)ELISAKit     N-(2-methyl-4-oxopentan-2-yl)-sulfamethoxazole  中文名：  分子式：C16H21N3O4S 

小鼠β酚(β-naphthol)LISA試劑盒              Bisphenol P  中文名：雙酚P  分子式：C24H26O2

2-甲氧雌二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)  2-Methoxyestradiol  質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品 MouseLactateDehydrogenase,LDHELISA試劑盒小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸苯乙雙胍/降糖靈/鹽酸苯乙福明  Phenformin   質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 ，英文名： PEDF ELISA Kit

鹽酸苯乙雙胍/降糖靈/鹽酸苯乙福明(標(biāo)準(zhǔn)品)  Phenformin   質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測(cè)定 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousemaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAkit 96T/48T

頭孢哌酮鈉  Cefoperazone   質(zhì)量規(guī)格：870μg-1015μg /mg,USP,BR 人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)試劑盒 Human SCF/MGF ELISA kit

頭孢哌酮鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)  Cefoperazone   質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定 RatInsulin,INSELISAKit大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

N-芐基甘氨酸  N-Benzylglycine  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BR BrdU標(biāo)記法組織石蠟切片細(xì)胞繁殖NBT顯色檢測(cè)試劑盒10/20

扎那米韋  Zanamivir  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,一水物 MouseLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

扎那米韋(標(biāo)準(zhǔn)品)  Zanamivir  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠狀腺原酸(T3)ELISA試劑盒 ，英文名： T3 ELISA Kit

去氧氟尿苷/5'-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷  Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousemonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAkit 96T/48T

醋甲唑胺  Methazolamide  質(zhì)量規(guī)格：≥97.0%,BR 人干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)試劑盒 Human IFITM1 ELISA kit

人轉(zhuǎn)錄激活因子4(ATF4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human ATF4 (Activating anscription Factor 4) ELISA Kit  2''-O-Acetylsprengerinin C  1220707-33-4  中文名：  分子式：C46H72O17  度：%  關(guān)鍵詞：  麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白elisa試劑盒   人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒、人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  152628-02-9  中文名：  分子式：C19H20N4  度：98.0%   

人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)ELISA試劑盒     3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one  中文名：  分子式：C15H18ClNO3  度：98.0%

人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGF-β3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human TGF-β3 (ansforming Growth Factor β3) ELISA Kit                  3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal  中文名：  分子式：C21H16FNO 

人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2elisa試劑盒   人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  152628-02-9  中文名：  分子式：C19H20N4