注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	甲型流感病毒N亞型(IAV-N)核酸試劑盒原理
英文名稱	詳見說明
貨號(hào)	BJ-R014852

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

甲型流感病毒N亞型(IAV-N)核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

小鼠白介素 -10 (mouse IL-10)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   法國(guó) Diaclone     Cabozantinib  中文名：卡博替尼  分子式：C28H24FN3O5 

小鼠白介素 -1 a (mouse IL-1 a )   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender     Azathioprine  中文名：硫唑嘌呤  分子式：C9H7N7O2S 

小鼠白蛋白   英文名稱：   Albumin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ALB  Dexamethasone 21-phosphate di salt  中文名：地塞米松磷酸鈉  分子式：C22H30FO8P 

小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4（OCT4）ELISA試劑盒     Candesartan  中文名：坎地沙坦  分子式：C24H20N6O3  度：98.0%

小鼠癌胚抗原elisa試劑盒   小鼠癌胚抗原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠癌胚抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠癌胚抗原試劑盒、小鼠癌胚抗原elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Bupivacaine   18010-40-7  中文名：鹽酸布比卡因  分子式：C18H29ClN2O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

咖啡酸  Caffeic acid  質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BR Rathydroxyproline,HypELISAKit大鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

咖啡酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Caffeic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Bradford大量蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒50

咖啡酸(進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品)  Caffeic acid  質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%(T),進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品 MouseIerleukin5,IL-5ELISA試劑盒小鼠白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸新霉素  Neomycin sulfate  質(zhì)量規(guī)格：≥600 I.U. /mg,USP,BR 小鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒 ，英文名： NSE ELISA Kit

硫酸新霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Neomycin sulfate  質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定 小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousetumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AILR1ELISAKit 96T/48T

鹽酸苯海拉明  Diphenhydramine   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人桿狀病毒IAP重復(fù)包含蛋白2/3(BIRC2/3)試劑盒 Human BIRC2/3 ELISA Kit

鹽酸苯海拉明(標(biāo)準(zhǔn)品)  Diphenhydramine   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rathypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

聚肌苷酸  Polyinosinic acid  質(zhì)量規(guī)格：≥90.0%,BR Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒200

米屈肼  Mildronate,Meldonium  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,二水合物 MouseIerleukin6,IL-6ELISA試劑盒小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

米屈肼(標(biāo)準(zhǔn)品)  Mildronate,Meldonium  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒 ，英文名： NP-Y ELISA Kit

人組織蛋白酶Kelisa試劑盒   人組織蛋白酶K試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人組織蛋白酶K試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶K試劑盒、人組織蛋白酶K elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  3',5'-Anhydrothymidine  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%

人組織蛋白酶K(cath-K)ELISAKit     Thiamphenicol  中文名：甲砜霉素  分子式：C12H15Cl2NO5S 

人組織蛋白酶Delisa試劑盒   人組織蛋白酶D試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人組織蛋白酶D試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶D試劑盒、人組織蛋白酶D elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     3',5'-Anhydrothymidine  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4 

人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒     3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人組織蛋白酶B(cath-B)ELISA試劑盒     3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4