注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
乙型腦炎病毒PCR檢測試劑盒原理 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014752 |
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
乙型腦炎病毒PCR檢測試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
小鼠過敏/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒
Dexamethasone-17-acetate 中文名:醋酸地塞米松 分子式:C24H31FO6 度:98.0%
小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒 Dexamethasone-17-acetate 中文名:醋酸地塞米松 分子式:C24H31FO6
小鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA試劑盒
Dexamethasone-17-acetate
1177-87-3 中文名:醋酸地塞米松 分子式:C24H31FO6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒
Dexamethasone-17-acetate
1177-87-3 中文名:醋酸地塞米松 分子式:C24H31FO6
小鼠固(mouse ALD) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進口分裝
Mestanolone
鹽酸洛美沙星
Lomefloxacin HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 Human BMP-6 ELISA Kit
鹽酸洛美沙星(標準品)
Lomefloxacin HCl 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 RatFattyacyl-CoAsyhetase,ACSELISAKit大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氯替潑諾
Loteprednol Etabonate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0% 721型分光光度儀1毫升1厘米光徑塑料比色皿1個
氯替潑諾(標準品) Loteprednol Etabonate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99.0%,標準品 Mouseglucocoicoidreceptor,GRELISA試劑盒小鼠糖皮質(zhì)類受體(GR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
洛伐他汀
Lovastatin,Monacolin K 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng) 小鼠鐵蛋白(FE)ELISA 試劑盒
洛伐他汀(標準品) Lovastatin,Monacolin K 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 Siated muscle actinin alpha (SM Actinin- a) ELISA Kit 大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒
盧比前列腺素/盧比前列酮 Lubiprostone 質(zhì)量規(guī)格:>99% Humanmannosereceptor,MRELISAKit 人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
賴氨酸加壓素;賴氨加壓素
Lypressin Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ChickenansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
醋酸M肽 Matrixyl Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>95%脂溶性的 載玻片細胞RUNX3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20
鹽酸甲氯芬酯 Meclofenoxate HCl 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
柚皮苷二氫查爾酮 Naringin dixy7nochalcone 分 子 量:582.5500 CAS編號:18916-17-1 分子式:C27H34O14 別 名:柚皮甙二氫查爾酮 基本用途:含量測定。
九里香Murraya exotica Paniculidine A 圓錐定 A 97399-93-4 C14H17NO2 續(xù)隨二萜醇
中藥對照藥材連翹120908-200512TLC法鑒別
3-安基丙醇標準品156-87-6 100mg3-安基丙醇標準品
射干Belamcanda chinensis (L.) DC Irisflorentin 次野鳶尾黃素 41743-73-1 C20H18O8 ≥98%