注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng): 猩紅熱鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
英文名稱(chēng): 詳見(jiàn)說(shuō)明
產(chǎn)品貨號(hào): BJ-R014734
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類(lèi): PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
猩紅熱鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISAKit Mesterolone 1424-00-6 中文名:甲氫 分子式:C20H32O2
小鼠環(huán)0酸腺苷(mouse
cAMP) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進(jìn)口分裝
Dihydrotanshinone I 中文名: 分子式:C18H14O3 度:98.5%
小鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
Dimethylolurea 中文名:雙羥甲脲 分子式:C3H8N2O3
小鼠環(huán)0酸鳥(niǎo)苷elisa試劑盒 小鼠環(huán)0酸鳥(niǎo)苷試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠環(huán)0酸鳥(niǎo)苷試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠環(huán)0酸鳥(niǎo)苷試劑盒、小鼠環(huán)0酸鳥(niǎo)苷eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Ceftiofur 103980-44-5 中文名:頭孢噻呋鹽酸鹽 分子式:C19H18ClN5O7S3
小鼠環(huán)0酸鳥(niǎo)苷(mouse cGMP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Dihydrotanshinone I 中文名: 分子式:C18H14O3
克霉唑
Clotrimazole 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 5-羥色胺(Serotonin)轉(zhuǎn)運(yùn)功能檢測(cè)試劑盒20
克霉唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Clotrimazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 MouseFreeThyroxine,FT4ELISA試劑盒小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
秋水仙堿
Colchlcine 質(zhì)量規(guī)格:> 98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠突觸素(SYP)ELISA試劑盒 ,英文名: SYP ELISA Kit
秋水仙堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Colchlcine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔血管**素2(ANG-2)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit
96T/48T
硫酸粘桿菌素,多粘菌素E硫酸鹽 Colistin
Sulphate 質(zhì)量規(guī)格:≥19000IU/mg,EP6 牛特異性蛋白B(PSPB)試劑盒 Bovine
Pregnancy Specific Protein B,PSPB ELISA Kit
硫酸粘桿菌素(標(biāo)準(zhǔn)品) Colistin Sulphate 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定 英文名稱(chēng)Humaissueinhibitorofmaixmetalloproteinase-2,TIMP-2ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)規(guī)格:96T/48T
鹽酸依氟鳥(niǎo)氨酸
Eflornithine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,水合物 動(dòng)物甲狀腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10
色甘酸鈉
Cromolyn 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Ratprogesteronereceptor,PGRELISA試劑盒大鼠孕同受體(PGR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
色甘酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
Cromolyn 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠突觸融合蛋白2(STX2)ELISA試劑盒 ,英文名: STX2 ELISA Kit
環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A Cyclosporine A 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISAKit 96T/48T
油橄欖 Olea europaea L. Protocatechuic acid 原兒茶酸 99-50-3 C7H6O4 ≥98%
速Kcqmpfqrol20mg/支
去亞甲基小檗減 Demetxyleneperberine 25459-91-0 20mg HPLC≥98% 去亞甲基小檗減 25459-91-0
含量測(cè)定鹽酸喹那普利100568-200401常溫,避光100mg
地丹諾辛相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品4097-22-725mg