注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
嗜水氣單胞菌PCR檢測試劑盒原理 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014700 |
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
嗜水氣單胞菌PCR檢測試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
小鼠巨噬細胞炎性蛋白-1α 英文名稱: Macrophage Inflammatory protein 1α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
MIP-1α/CCL3
Edaravone 中文名:依達拉奉 分子式:C10H10N2O 度:98.0%
小鼠巨噬細胞炎性蛋白-1 英文名稱: Macrophage
Inflammatory protein 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: MIP-1
Emtricitabine 中文名:恩曲他濱 分子式:C8H10FN3O3S
小鼠巨噬細胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒
Eleutheroside C 15486-24-5 中文名: 分子式:C8H16O6 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠巨噬細胞趨化蛋白-3 英文名稱: monocyte
chemotactic protein 3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: MCP-3
Lapachol 84-79-7 中文名:拉帕醇 分子式: 度:98.0% 關(guān)鍵詞: ; ; 抗腫瘤; 萘醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠巨噬細胞趨化蛋白-1 英文名稱: monocyte chemotactic protein 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: MCP-1 Lapachol 中文名:拉帕醇 分子式:
原莪述烯醇 HPLC≥95% 20mg 調(diào)料D-葡萄糖酸內(nèi)脂比色法定量檢測試劑盒20
醉椒素 HPLC≥95% 20mg
RatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISA試劑盒大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,二氫甲氧醉椒素 HPLC≥95% 20mg 小鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 ,英文名: VK1 ELISA Kit
黃卡瓦胡椒素B HPLC≥95% 20mg 小鼠白細胞分化抗原30(CD30)ELISA檢測試劑盒MouseClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit
96T/48T
,二甲氧基黃烷酮 HPLC≥95% 20mg 人含SET域4(setd4)試劑盒 human setd4 ELISA Kit
楮樹黃酮醇F HPLC≥95% 20mg
RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit大鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,'二異戊烯基金雀異黃素 HPLC≥95% 20mg 4-氨基-3-肼基-5巰基-1,2,4-三氮唑(AHMT)10克
山豆根黃烷酮A HPLC≥95% 20mg
MouseEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒小鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
龍血素D HPLC≥95% 20mg 小鼠維生素K1(VK1)ELISA 試劑盒
血竭黃烷A HPLC≥95% 20mg Rat osteocalcin / bone gla protein (OT/BGP) ELISA Kit 大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒
銀杏內(nèi)酯C Ginkgolide C (≥98%,HPLC) 15291-76-6 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
吳茱萸Evodia raecarpa none 67879-81-6 C16H19NO3 ≥95% 果糖(F0550000
Honokiol和厚樸酚35354-74-620mg/支
羥丙基甲基纖維素標(biāo)準(zhǔn)品9004-65-3 250mg
雪松Cedrus deodara Cedrin 雪松素 75513-81-4 C16H14O8 ≥95%